2016醫(yī)學(xué)微生物學(xué)沖刺重點:志賀菌屬
志賀菌屬:是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌,俗稱痢疾桿菌,人類是其主要宿主,靈長類動物也是其天然宿主。下面是百分網(wǎng)小編分享的一些相關(guān)資料,供大家參考。
一、生物學(xué)性狀
、貵-的短小桿菌,無芽胞,無鞭毛,無芽胞,有菌毛,營養(yǎng)要求不高
②分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,除宋內(nèi)志賀菌個別遲緩發(fā)酵乳糖(一般3~4天)外,均不發(fā)酵乳糖。在S.S等選擇培養(yǎng)基上呈無③色半透明菌落。
、軇恿﹃幮裕鹉c道疾病的無動力細(xì)菌。
⑤志賀菌有O和K兩種抗原,O抗原是分類依據(jù),借以將4群和40余血清型(包括亞型)。
A群——痢疾志賀菌(10)
B群——福氏志賀菌(13)→我國最常見
C群——鮑氏志賀菌(18)
D群——宋內(nèi)志賀菌(1)
二、致病性和免疫性
、逯虏∥镔|(zhì):包括侵襲力和內(nèi)毒素,有的尚能產(chǎn)生外毒素。
、嫠录膊。
、僦举R菌引起細(xì)菌性痢疾。我國常見的主要是福氏志賀菌(B群)和宋內(nèi)志賀菌(D群)。
②傳染源是病人和帶菌者。傳播途徑主要通過糞—口途徑。
、壑举R菌傳染幾乎只限于腸道,一般不侵入血液。
、苤举R菌感染有急性和慢性兩種,典型的急性細(xì)菌性痢疾經(jīng)過1~3天潛伏期后突然發(fā)病,常有發(fā)熱、腹痛、水樣腹瀉,約一天左右,腹瀉次數(shù)增多,并有水樣腹瀉轉(zhuǎn)變?yōu)槟撗ひ罕,伴有里急后重,下腹疼痛等?/p>
④急性中毒性痢疾常見于小兒,常無明顯消化道癥狀而表現(xiàn)為全身中毒癥狀。急性細(xì)菌性痢疾與10%~20%的病人可轉(zhuǎn)變?yōu)槁浴?/p>
、缑庖咝裕嚎垢腥久庖咧饕窍勒衬け砻娴姆置谛訧gA,病后免疫期短暫。
三、微生物檢測
標(biāo)本采集
盡可能在發(fā)病早期及治療前采集新鮮糞便,選擇膿血便或粘液便,必要時可用肛拭子采集。
檢驗方法及鑒定
生化鑒定
檢查麥康凱瓊脂平板,志賀氏菌的`菌落為淺粉紅色,半透明,將此可疑菌落接種于下列培養(yǎng)基中:葡萄糖肉湯,TSI瓊脂斜面,賴氨酸脫羧酶肉湯,動力試驗瓊脂和胰胨。置35℃培養(yǎng)48h,但應(yīng)在20h進(jìn)行檢查,棄去所有有動力、產(chǎn)H2S、產(chǎn)氣、賴氨酸脫羧以及發(fā)酵蔗糖與乳糖的培養(yǎng)物。關(guān)于產(chǎn)生吲哚者,應(yīng)棄去其44℃增菌物中的陽性培養(yǎng)物。至于42℃增菌培養(yǎng)中的所有可疑培養(yǎng)物皆有可能是陽性或是陰性,因此皆應(yīng)予保留[1] 。
血清凝集法
志賀氏菌有 K和O抗原而無H抗原。K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體表面抗原,不耐熱,加熱100℃1小時被破壞。K抗原在血清學(xué)分型上無意義,但可阻止O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)。根據(jù)志賀氏菌抗原構(gòu)造的不同,可分為四群48個血清型(包括亞型)。
(1)A群:又稱痢疾志賀氏菌(Sh.dysenteriae),通稱志賀氏痢疾桿菌。不發(fā)酵甘露醇。有12個血清型,其中8型又分為三個亞型。
(2)B群:又稱福氏志賀氏菌(Sh.flexneri),通稱福氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇。有15個血清型(含亞型及變種),抗原構(gòu)造復(fù)雜,有群抗原和型抗原。根據(jù)型抗原的不同,分為6型,又根據(jù)群抗原的不同將型分為亞型;X、Y變種沒有特異性抗原,僅有不同的群抗原。
(3)C群:又稱鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii),通稱鮑氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,有18個血清型,各型間無交叉反應(yīng)。
(4)D群:又稱宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei),通稱宋內(nèi)氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,并遲緩發(fā)酵乳糖,一般需要3~4天。只有一個血清型。有兩個變異相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相為S型,Ⅱ相為R型。
分離培養(yǎng)
取糞便(粘液或膿血部分)或肛拭標(biāo)本接種GN肉湯增菌,增菌后進(jìn)行分離培養(yǎng)。一般同時接種強弱選擇性不同的兩個平板。強選擇鑒別培養(yǎng)基可用沙門、志賀菌選擇培養(yǎng)基(SS);若選擇診斷血清可選擇天津生物芯片福氏志賀式多價診斷血清可疑菌落進(jìn)行鑒定。
鑒定
挑選可疑菌落3~4個先用志賀菌屬多價診斷血清作試探性玻片凝集試驗。將試探性凝集試驗陽性的菌落至少接種2~3支KIA和MIU,經(jīng)35 ℃培養(yǎng)18~24h,凡符合;KIA:K/A、產(chǎn)氣-/+、H2S-;MIU:動力-、吲哚+/-、尿酶-,并結(jié)合試探性玻片凝集試驗陽性結(jié)果可鑒定為志賀菌屬。
核酸擴(kuò)增法
核酸擴(kuò)增技術(shù),即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設(shè)計、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對應(yīng)于待測病原微生物某一段特異性序列的兩端,然后在體外模擬DNA體內(nèi)復(fù)制的過程反復(fù)擴(kuò)增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。
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