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嚴重脂血標本時生化項目的檢測該如何處理
脂血標本是臨床檢驗常見的干擾原因。血脂中的CM和VLDL是懸浮顆粒,對生化檢測常用的比色法或比濁法有極大干擾。對于重度脂血樣本,由于樣本的本底吸光度過高,必須對樣本進行預處理。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P于嚴重脂血標本時生化項目的檢測該如何處理的知識,歡迎閱讀。
嚴重脂血標本時生化項目的檢測該如何處理
1、生理鹽水稀釋法:大部分全自動生化分析儀都具有自動稀釋、自動換算功能;也可以先手工稀釋,再將測定結果乘以稀釋倍數。這種方法可以在一定程度上降低樣本空白而提高測定的準確性,但是該法并不能完全消除脂濁對測定結果的影響,特別是要注意樣本稀釋后由于基質效應而導致測定結果出現一定的誤差。
2、乙醚抽提法:在高脂血樣本中加入有機溶劑乙醚,震蕩混勻后離心,可有效地將樣本中的甘油三酯等脂溶物質萃取出來。但是由于該方法加入了新的化學物質,會對有些檢驗項目的測定產生影響。
3、沉淀分離法:該方法來源于沉淀法測定HDL,即聯(lián)合使用磷鎢酸-鎂沉淀劑和聚乙二醇-硫酸葡聚糖沉淀劑,沉淀血清中的乳糜微粒、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白(a),該方法對部分檢驗項目的測定會產生影響,且操作繁瑣,因此該法也有一定的局限性。
4、干化學法:干化學分析儀是采用以Kubleka-Munk理論為主要理論基礎的多層薄膜的固相試劑技術,將發(fā)生在液相反應物中的反應,轉移到一個固相載體上,利用反射光度法和基于離子選擇電極(ISE)的差示電位法進行檢測的一類新型儀器。當全血通過多層薄膜的固相時,血細胞、脂濁微粒等物質可以被阻截,因此該法亦可有效地去除脂濁對生化檢驗結果的干擾。
5、高速離心法:將脂濁血清加蓋密封,經高速離心后,血清可以分成兩層,吸取下層的血清進行臨床生化測定,適用大部分臨床生化測定指標的測定。但該法設備要求較高,中小醫(yī)療機構沒有高速離心機,限制了該法的使用。
一般情況下都不做特殊處理,進行正常檢測,但在報告中會注明:嚴重脂血及結果僅供參考,建議復查。ALT、AST、UREA少數項目無法測出結果;TP、CREA結果偏低;TBIL、DBIL結果偏高,必要時可以對樣本進行稀釋,但對結果會有影響。
脂血標本是臨床常見的干擾原因,對比濁法和比色法的生化項目可以造成較大干擾。對不同的檢測項目可以采用不同的處理方法來消除干擾。
1)常用的化學方法有乙醚提取法,經過乙醚處理的脂血標本雖然可以排除脂濁對于ALT、AST、TP、TBIL、DBIL、HBDH、CK-MB、Crea等指標的干擾,但是不能排除對ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、CA等指標的干擾。生理鹽水稀釋法,是最常用的方法。還有沉淀分離法等。以上方法都需要注意基質效應的影響。
2)常用的物理學方法是高速離心法,高速離心法易于推廣,注意可能會得到溶血標本。
3)干化學法較好,可以有效排除脂血的影響。
遇嚴重脂血標本時,TG機外稀釋,其它生化項目檢測時我們用高速冷凍離心機,1-1.5萬轉/分處理,效果不錯。
嚴重脂血的標本,實驗室有條件應該進行超速離心分離后在檢測;也可以進行稀釋后再測,同時需要考慮稀釋后濃度過低超出檢測下限問題。
如方便,詢問患者是否進食后采血,因為吃飯后尤其是攝入過多脂質食物時,大量的乳糜微粒會進入血液中形成脂血,干擾很多生化檢測項目的測定。如果是體檢或是慢性疾病患者建議嚴格空腹8小時后采血,如果是空腹采血患者或是急診患者,應根據生化檢測項目進行相應的去血脂處理,如超速離心法、血脂清除劑等。在不具備清除血脂條件的基層實驗室,脂血標本測試完應標注標本類型為脂血標本,并告知臨床科室原因。
脂血標本的處理
在生化檢測中,脂血可對 ALT、AST、GGT、ALP 等項目形成干擾。若因為給予腸外營養(yǎng)支持治療而出現的脂血標本,會干擾患者正常檢測結果,脂血對血常規(guī)的影響主要是可通過影響 Hb 的比色測定導致 Hb 假性增高,MCH 及 MCHC 也隨之增高。此外,脂血標本對凝血結果也會產生影響。 由于脂血還會影響血紅蛋白分析,所以危害性更甚于溶血,所以當遇到有脂血時,我們會退回標本,并建議患者隔天空腹檢查。若是沒法退回標本并隔天空腹檢查的,我們要做好處理。
1、使用超速離心機離心
美國臨床和實驗室標準協(xié)會( CLSI )推薦使用超速離心處理血脂樣本。常規(guī)離心后的血清加蓋密封,使用超速離心機,促使乳糜微粒層分離出,然后吸下層清液再進行檢測。超速離心機轉速要大于六萬轉,如果不具備條件,可以使用高速離心機,但要根據情況多離心幾遍。但是需要注意甘油三酯和膽固醇不建議使用高速離心后的血清進行檢測,離心后檢測結果會低于離心前,尤其是甘油三酯下降明顯。
2、血清(血漿)稀釋法
血清(血漿)稀釋適用于使用血清(血漿)進行檢測的項目,就是將血清(血漿)標本加入多倍的生理鹽水,降低血清中脂蛋白含量,達到檢測目的,但是這種方法受到儀器分析能力的限制,而且當稀釋倍數過大時還會造成稀釋誤差,都會造成結果不準。
3血漿置換法
血漿置換適用于脂血的血常規(guī)標本檢測,就是將血常規(guī)標本低速離心后,分離混濁血漿,棄去渾濁血漿后,加入等量生理鹽水置換,如此反復 3 ~ 4 次以上,再進行檢測。
4、公式計算法
這種方法針對于血常規(guī)檢測時血漿置換耗時費力, HGB 校正值= HGB 校正前 - HGB 脂血血漿×(1- HCT 校正前)
注:HGB 校正前是指脂血標本上機檢測血常規(guī)時得到的 HGB 值, HGB 脂血血漿是指將血常規(guī)標本離心后吸取渾濁血漿單獨進行全血細胞檢測時得到的 HGB 值, HCT 校正前是指脂血標本上機檢測血常規(guī)時得到的 HCT 值。相關研究表明,脂血血常規(guī)檢測時,與血漿置換相比,公式計算法簡單快速,適合急診標本。
以上這些方法都有著一定的局限性,比如說,甘油三酯和膽固醇離心后會降低,凝血中方法學是時間法的不可以使用稀釋法,血漿置換法很耗費時間等等,所以需要我們根據臨床、項目等多方面考慮適用方法,盡可能消除脂血對于檢測的印象,出具準確的檢驗報告。