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檢驗技師/士考點:抗血清的檢定
抗血清(antiserum)是一種含有多克隆抗體的血清。通過注射抗血清可以傳遞被動免疫(passive immunity)治療許多疾病。目前唯一能夠治療埃博拉病毒患者的方法就是通過注射前一個患者的抗血清到體內(nèi)。
含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑,常以抗原免疫小動物誘發(fā)產(chǎn)生多克隆抗體而得。抗血清的質(zhì)量直接影響分析的靈敏度和特異性。抗血清質(zhì)量的指標(biāo)主要有親和常數(shù)、交叉反應(yīng)率和滴度。
1.親和常數(shù)
親和常數(shù)(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應(yīng)抗原的結(jié)合能力。K值的單位為mol/L,即表示1mol抗體稀釋至若干L溶液中時,與相應(yīng)的抗原結(jié)合率達(dá)到50%.抗血清K值越大,放射免疫分析的靈敏度、精密和準(zhǔn)確度越佳。抗血清的K值達(dá)到109~1012mol/L才適合用于放射免疫分析。
2.交叉反應(yīng)率
放射免疫分析測定的物質(zhì)有些具有極為類似的結(jié)構(gòu),例如甲狀腺素的T3、T4,雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對一種抗原的抗血清往往對于其類似物會發(fā)生交叉反應(yīng)。因此交叉反應(yīng)率反映抗血清的特異性,交叉反應(yīng)率過大將影響分析方法的準(zhǔn)確性。交叉反應(yīng)率的測定方法為用與抗血清相應(yīng)抗原及其類似物用同法進(jìn)行測定,觀察置換零標(biāo)準(zhǔn)管50%時的量。以T3抗血清為例,置換零標(biāo)準(zhǔn)50%T3為1ng,其類似物T4則需200ng,則其交叉反應(yīng)率為:1/200=0.5%.
3.滴度
滴度系指將血清稀釋時能與抗原發(fā)生反應(yīng)的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度為在無受檢抗原存在時,結(jié)合50%標(biāo)記抗原時抗血清的稀釋度。
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