出凝血檢測注意事項(xiàng)
(1)實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查血漿是否有溶血、黃疸、脂血和出現(xiàn)凝塊。
紅細(xì)胞膜含有磷脂,溶血標(biāo)本具有與血小板第Ⅲ因子(磷脂)相似的凝血活性,這種磷脂能縮短溶血血漿的APTT值。標(biāo)本中如果出現(xiàn)凝塊,無論該凝塊多么小,均會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(2)許多實(shí)驗(yàn)誤差都來源于技術(shù)的錯誤。
在實(shí)驗(yàn)技術(shù)、試劑、溫度及PH值上很微小的變化都會導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果明顯的變化。孵育時間與溫度是在一期法凝血酶原時間測定時應(yīng)嚴(yán)格控制的參數(shù)。血漿絕不能在37℃下放置超過10分鐘,凝血活酶放置時間也不能超過說明書所規(guī)定的時限。
(3)血液凝固主要是酶催化的反應(yīng),因此實(shí)驗(yàn)過程中要嚴(yán)格控制理想的PH環(huán)境和溶液的離子強(qiáng)度。
多數(shù)常規(guī)試驗(yàn)都在處于血液生理PH值緩沖范圍的緩沖系統(tǒng)中進(jìn)行。反應(yīng)混合物的PH值必須處于7.2-7.4之間。
(4)血液與抗凝劑的`比例必須相當(dāng)精確。
抗凝劑在血標(biāo)本的絕對含量可改變血漿中鈣離子濃度,進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,一定要注意采血時血漿與抗凝劑的比例。
HCT對枸櫞酸鈉抗凝血漿APTT,PT的影響
HCT(%) PT(s) APTT(s)
80 52.5±7.74 60.5±10.3
70 14.9±0.98 38.5±3.1
60 13.5±1.46 37.2±4.0
40 11.1±0.66 33.3±4.3
20 10.4±0.17 28.2±1.4
10 10.0±0.58 23.3±3.2
(5)試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確還取決于所用的反應(yīng)物的量、加入順序和不同反應(yīng)物的孵育時間。
如每次APTT實(shí)驗(yàn)時,活化部分凝血活酶試劑和血漿混合物的孵育時間必須一致。混勻過程決定了APTT試驗(yàn)中接觸活化的量,在孵育時如果將活化部分凝血活酶與血漿混合的技術(shù)不佳,將會改變測定結(jié)果。
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