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高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)
高中生物實(shí)驗(yàn)歸納
1、經(jīng)典實(shí)驗(yàn)的選材問題
(1)制備細(xì)胞膜時(shí)，常選哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞。 (2)不能用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體。
原因：葉綠體中的色素顏色會(huì)掩蓋健那綠染色后（藍(lán)綠色）的顏色變化。
(3)觀察細(xì)胞的有絲分-裂或低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目的變化時(shí)，應(yīng)注意觀察呈正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞。
原因：正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞處于分-裂狀態(tài)，長方形的細(xì)胞可能是根尖的伸長區(qū)或成熟區(qū)的細(xì)胞，沒有分-裂能力。
(4)觀察細(xì)胞的減數(shù)分-裂所選的材料可以是動(dòng)物的精巢和植物的雄蕊，而不宜選用動(dòng)物的卵巢和植物的雌蕊。
原因：雄配子的產(chǎn)生數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于雌配子，更容易觀察到減數(shù)分-裂的細(xì)胞。 (5)觀察葉綠體時(shí)，選用菠菜葉且稍帶些葉肉的下表皮。 原因：靠近下表皮的葉肉細(xì)胞中的葉綠體較大而數(shù)目較少。
(6)觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原應(yīng)選取成熟的紫色洋蔥表皮細(xì)胞。 原因：含有紫色大液泡，便于觀察。 (7)觀察染色體：選用有絲分-裂中期的細(xì)胞。
原因：該時(shí)期染色著絲點(diǎn)排列在赤道板上，體形態(tài)最為穩(wěn)定，容易觀察。
2、高中生物實(shí)驗(yàn)中常用的化學(xué)藥品
①NaOH溶液：用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H； ②Ca(OH)2溶液：鑒定CO2； ③鹽酸溶液：解離或改變?nèi)芤旱膒H； ④NaHCO3溶液：提供CO2；
⑤NaCl：配制生理鹽水及其他不同濃度的鹽溶液，可用于測(cè)定動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度或用于提取DNA；
⑥酒精：用于消毒處理、提純DNA、葉片脫色及配制解離液；
⑦蔗糖：配制蔗糖溶液，用于測(cè)定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原。
3、高中生物實(shí)驗(yàn)方法匯總
(1)制作DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型——構(gòu)建物理模型法
(2)種群數(shù)量增長模型——構(gòu)建數(shù)學(xué)模型法
(3)分離各種細(xì)胞器——差速離心法
(4)證明DNA進(jìn)行半保留復(fù)制——密度梯度離心法
(5)分離葉綠體中的色素——紙層析法
(6)觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分-裂——死體染色法
(7)觀察線粒體——活體染色法
(8)探究酵母菌的呼吸方式——對(duì)比實(shí)驗(yàn)法和產(chǎn)物檢測(cè)法
(9)赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)——同位素標(biāo)記法
(10)摩爾根證明基因在染色體上——假說—演繹法
(11)薩頓提出“基因位于染色體上”的假說——類比推理法
(12)調(diào)查土壤中小動(dòng)物類群的豐富度——取樣器取樣法
(13)估算種群密度(運(yùn)動(dòng)能力強(qiáng)的生物)——標(biāo)志重捕法
(14)估算種群密度(運(yùn)動(dòng)能力弱的生物)——樣方法（五點(diǎn)取樣和等距取樣）
4、快速檢驗(yàn)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)、產(chǎn)物或結(jié)構(gòu)的檢測(cè)方法(指示劑)
①淀粉：碘液；
②還原糖：斐林試劑、班氏試劑（磚紅色沉淀）；
③CO2：Ca(OH)2溶液、酸堿指示劑、溴麝香草酚藍(lán)水溶液；
④乳酸：pH試紙；
⑤有O2：余燼木條復(fù)燃；無O2：火焰熄滅；
⑥脂肪：蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液（橘黃色或紅色）；
⑦蛋白質(zhì)：雙縮脲試劑（紫色絡(luò)合物）；
⑧染色體：堿性染料（龍膽紫、醋酸洋紅溶液）；
⑨DNA：甲基綠（綠色）/二苯胺（水浴加熱——藍(lán)色）；RNA：吡羅紅（紅色）； ⑩線粒體：健那綠（藍(lán)綠色）；
酒精：酸性條件下的重鉻酸鉀溶液（灰綠色）。
5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法
①光合速率：O2釋放量、CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量；
②呼吸速率：O2吸收量、CO2釋放量或淀粉減少量；
③原子轉(zhuǎn)移途徑：放射性同位素示蹤法；
④細(xì)胞液濃度大小：質(zhì)壁分離；
⑤細(xì)胞是否死亡：質(zhì)壁分離、亞甲基藍(lán)溶液染色；
⑥甲狀腺激素作用：動(dòng)物耗氧量、發(fā)育速度等；
⑦生長激素作用：生長速度(體重變化、身高變化)； ⑧胰島素作用：動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài)。
6、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法
①增加水中氧氣：泵入空氣或吹氣或放入綠色植物； ②減少水中氧氣：容器密封或油膜覆蓋或用涼開水；
③除去容器中CO2：密閉實(shí)驗(yàn)裝置中放入NaOH溶液或KOH溶液； ④除去葉片中原有淀粉：置于黑暗環(huán)境一晝夜（饑餓處理）； ⑤除去葉片中葉綠素：酒精加熱。
⑥避免光合作用對(duì)呼吸作用的干擾：給植株遮光（黑暗處理）；
7、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法
①還原糖鑒定：水浴加熱煮沸；
②酶促反應(yīng)：水浴保溫(最適溫度或?qū)嶒?yàn)給定溫度)； ③用酒精溶解葉中的葉綠體色素：酒精要隔水加熱； ④二苯胺試劑鑒定DNA：水浴煮沸加熱； ⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng)。
8、調(diào)查類實(shí)驗(yàn)
一般程序：確定課題和實(shí)驗(yàn)方案―→實(shí)施計(jì)劃―→結(jié)果分析―→結(jié)論―→建議。
9、觀察類實(shí)驗(yàn)
10、鑒定類實(shí)驗(yàn)歸類比較
教學(xué)-高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)
中學(xué)生物教學(xué)資料
高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)
實(shí)驗(yàn)七觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原
1、條件：細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差，活細(xì)胞，大液泡
2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞（具紫色大液泡），質(zhì)量濃度http://emrowgh.com的蔗糖溶液，清水等
3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片→觀察→蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)→蓋玻片一側(cè)滴清水,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原)
4、結(jié)論:細(xì)胞外溶液濃度＞細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞失水質(zhì)壁分離
細(xì)胞外溶液濃度＜細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞吸水質(zhì)壁分離復(fù)
知識(shí)概要：制片觀察加液觀察加水觀察
考點(diǎn)提示：
（1）洋蔥為何要選紫色的？若紫色過淡怎么辦？
紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化；縮小光圈，使視野變暗些。
（2）洋蔥表皮應(yīng)撕還是削？為何？表皮應(yīng)撕不能削，因?yàn)橄鞯谋砥ね瘛?/p>
（3）植物細(xì)胞為何會(huì)出現(xiàn)質(zhì)壁分離？動(dòng)物細(xì)胞會(huì)嗎？當(dāng)細(xì)胞失去水分時(shí)，其原生質(zhì)層的伸縮性大于細(xì)胞壁的伸縮性；動(dòng)物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁。
（4）質(zhì)壁分離時(shí)，液泡大小和顏色的變化？復(fù)原時(shí)呢？
細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)，液泡變小，紫色加深；當(dāng)細(xì)胞質(zhì)壁分離復(fù)原時(shí)，液泡變大，紫色變淺。
（5）若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細(xì)胞，不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，其原因是什么？ 細(xì)胞已經(jīng)死亡（可能是外界溶液濃度過大，細(xì)胞失水過多或質(zhì)壁分離時(shí)間過長）
（6）高倍鏡使用前，裝片如何移動(dòng)？
若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向上移動(dòng)。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向左方移動(dòng)，因?yàn)轱@微鏡視野中看到的是倒像。
（7）換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰？視野明暗度會(huì)怎樣變化？如何調(diào)亮？換高倍物鏡后，應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物像變得清晰；視野會(huì)變暗，可調(diào)大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。
（8）所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數(shù)的關(guān)系？目鏡越長，放大倍數(shù)越��；物鏡越長，放大倍數(shù)越大。
（9）物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數(shù)的關(guān)系？
物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數(shù)越大。
（10)總放大倍數(shù)的計(jì)算方法？放大倍數(shù)具體指面積的放大倍數(shù)還是長度的放大倍數(shù)？
總放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積；放大倍數(shù)是指細(xì)小物體長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù)
（11）放大倍數(shù)與視野中細(xì)胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系？
放大倍數(shù)越大，視野中細(xì)胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。
（12）更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上；更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動(dòng)載玻片，若異物移動(dòng)，則異物在載玻片上。
（13）怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來測(cè)定植物細(xì)胞液的濃度？①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細(xì)胞的臨時(shí)裝片③用顯微鏡觀察某植物細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細(xì)胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。 實(shí)驗(yàn)八DNA的粗提取與鑒定
考點(diǎn)提示：
（1)雞血能用豬血代替嗎？為什么？不能，因?yàn)椴溉閯?dòng)物的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核，不能提取DNA。
（2）雞血中為何要加檸檬酸鈉？為何要棄去雞血細(xì)胞的上清液？
防止血液凝固；因?yàn)樯锨逡菏茄獫{，不含細(xì)胞和DNA。
（3）脹破細(xì)胞的方法？能用生理鹽水嗎？
向血細(xì)胞中加入蒸餾水，使細(xì)胞大量吸水而脹破；不能用生理鹽水，因?yàn)檠?xì)胞在蒸餾水中不能吸收水分。
（4）該實(shí)驗(yàn)中最好應(yīng)用玻璃燒杯還是塑料燒杯？為什么？最好用塑料燒杯，因?yàn)椴Ａ菀孜紻NA。
（5）前后三次過濾時(shí)，所用紗布的層數(shù)分別是多少？為什么？
第一次用一層紗布，有利于核物質(zhì)透過紗布進(jìn)入濾液；第二次用多層紗布，能防止DNA絲狀物透過紗布進(jìn)入濾液；第三次用兩層紗布，既有利于DNA透過紗布，又能防止其它雜質(zhì)透過紗布。
（6）若實(shí)驗(yàn)中所得黏稠物太少，其原因是什么？第一次加蒸餾水過少，細(xì)胞未充分脹破；第二次加蒸餾水過多或過少；第一次過濾用了多層紗布；第二次過濾用了一層紗布。
（7）兩次加入蒸餾水的目的分別是什么？
第一次是為了使血細(xì)胞吸水脹破；第二次是為了降低氯化鈉的濃度，有利于DNA有析出。
（8）實(shí)驗(yàn)中攪拌溶液時(shí)，為何總要沿一個(gè)方向攪拌？防止DNA分子受到損傷。
（9）兩次析出DNA的方法分別是什么？原理分別是什么？
第一次是加蒸餾水，降低氯化鈉的濃度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因?yàn)镈NA不溶于酒精溶液。
（10)三次溶解DNA的液體分別是什么？原理分別是什么？
第一次、第二次都是用濃度為2mol/L的氯化鈉溶液，第三次用的是http://emrowgh.com（或2mol/L）的氯化鈉溶液。其原理是DNA在氯化鈉中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為http://emrowgh.com時(shí)，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化鈉溶液和0。015mol/L的氯化鈉溶液對(duì)DNA的溶解度都比較高。
（11)鑒定DNA時(shí)為何要用兩支試管？其現(xiàn)象分別是什么？
其中不加DNA的試管起對(duì)照作用。該試管溶液不變色，另一支加有DNA的試管溶液變藍(lán)色。 實(shí)驗(yàn)五、比較酶和Fe3+的催化效率
考點(diǎn)提示：
（1）為何要選新鮮的肝臟？因?yàn)樵诓恍迈r的肝臟中，過氧化氫酶的活性會(huì)由于細(xì)菌的破壞而降低。
（2）該實(shí)驗(yàn)中所用試管應(yīng)選較粗的還是較細(xì)的？為什么？應(yīng)選用較粗的，因?yàn)樵谳^細(xì)的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛(wèi)生香的復(fù)燃。
（3）為何要選動(dòng)物的肝臟組織來做實(shí)驗(yàn)，其他動(dòng)植物的組織的研磨液能替代嗎？因?yàn)楦闻K組織中過氧化氫酶含量較豐富；其它動(dòng)植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。
（4）相同質(zhì)量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個(gè)催化效果好？為什么？研磨液效果好；因?yàn)樗黾舆^氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。
（5）滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時(shí)，可否共用下個(gè)吸管？為什么？不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實(shí)驗(yàn)效果。
實(shí)驗(yàn)六色素的提取和分離
1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素
各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同——分離色素
2、步驟：
（1）提取色素研磨
（2）制備濾紙條
（3）畫濾液細(xì)線：均勻，直，細(xì)，重復(fù)若干次
（4）分離色素：不能讓濾液細(xì)線觸及層析液
（5）觀察和記錄:結(jié)果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍(lán)綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b).
考點(diǎn)提示：
（1）對(duì)葉片的要求？為何要去掉葉柄和粗的時(shí)脈？綠色、最好是深綠色。因?yàn)槿~柄和葉脈中所含色素很少。
（2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？
為了使研磨充分。不加二氧化硅，會(huì)使濾液和色素帶的顏色變淺。
（3）丙酮的作用？它可用什么來替代？用水能替代嗎？
溶解色素。它可用酒精等有機(jī)溶劑來代替，但不能用水來代替，因?yàn)樯夭蝗苡谒?/p>
（4）碳酸鈣的作用？不加碳酸鈣對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？
保護(hù)色素，防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會(huì)變成黃綠色或褐色。
（5）研磨為何要迅速？要充分？過濾時(shí)為何用布不用濾紙？研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發(fā)；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。
（6）濾紙條為何要剪去兩角？防止兩側(cè)層析液擴(kuò)散過快。
（7）為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線？因?yàn)殇摴P水或圓珠筆油中含有其它色素，會(huì)影響色素的分離結(jié)果。
（8）濾液細(xì)線為何要直？為何要重畫幾次？防止色素帶的重疊；增加色素量，使色素帶的顏色更深一
些。
（9）濾液細(xì)線為何不能觸到層析液？防止色素溶解到層析液中。
（10）濾紙條上色素為何會(huì)分離？
由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度就不同
（11）色素帶最寬的是什么色素？它在層析液中的溶解度比什么色素大一些？
最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。
（12）濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素？胡蘿卜素和葉黃素。
（13)色素帶最窄的是第幾條色素帶？為何？
第一條色素帶，因?yàn)楹}卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。
實(shí)驗(yàn)三觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片
2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無色。
知識(shí)概要：
取材制片低倍觀察高倍觀察
考點(diǎn)提示：
（1)為什么可直接取用蘚類的小葉，而不能直接取用菠菜葉？
因?yàn)樘\類的小葉很薄，只有一層細(xì)胞組成，而菠菜葉由很多層細(xì)胞構(gòu)成。
（2）取用菠菜葉的下表皮時(shí)，為何要稍帶些葉肉？
表皮細(xì)胞除保衛(wèi)細(xì)胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細(xì)胞含較多的葉綠體。
（3)怎樣加快黑藻細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度？最適溫度是多少？進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25℃左右。
（4）對(duì)黑藻什么部位的細(xì)胞觀察，所觀察到的細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的現(xiàn)象最明顯？葉脈附近的細(xì)胞。
（5）若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)方向?yàn)轫槙r(shí)針，則在裝片中該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的實(shí)際流動(dòng)方向是怎樣的？仍為順時(shí)針。 （6）是否一般細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不流動(dòng)，只有黑藻等少數(shù)植物的細(xì)胞質(zhì)才流動(dòng)？ 否，活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)都是流動(dòng)的。
（7）若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，則對(duì)顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)？
視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些，可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。
（8）在強(qiáng)光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。 實(shí)驗(yàn)四觀察有絲分-裂
1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜）
2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng)
（二）裝片的制作
制作流程：解離→漂洗→染色→制片
1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液).
時(shí)間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來.
2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.
3.染色:用質(zhì)量濃度為http://emrowgh.com或http://emrowgh.com的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min
目的:使染色體著色,利于觀察.
4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.目的:使細(xì)胞分散開來,有利于觀察.
（三）觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密,有的細(xì)胞正在分-裂。
2、換高倍鏡下觀察：分-裂中期→分-裂前、后、末期→分-裂間期。（注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn)）。其中，處于分-裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。
考點(diǎn)提示：
（1)培養(yǎng)根尖時(shí)，為何要經(jīng)常換水？增加水中的氧氣，防止根進(jìn)行無氧呼吸造成根的腐爛。
（2）培養(yǎng)根尖時(shí)，應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥？為什么？應(yīng)選用舊洋蔥，因?yàn)樾卵笫[尚在休眠，不易生根。
（3）為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時(shí)間是何時(shí)？為何？
因?yàn)楦夥稚鷧^(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分-裂；上午10時(shí)到下午2時(shí)；因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞分-裂活躍。
（4）解離和壓片的目的分別是什么？壓片時(shí)為何要再加一塊載玻片？解離是為了使細(xì)胞相互分離開來，壓片是為了使細(xì)胞相互分散開來；再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。
（5）若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？壓片時(shí)用力過大。
（6)解離過程中鹽酸的作用是什么？丙酮可代替嗎？分解和溶解細(xì)胞間質(zhì)；不能，而硝酸可代替。
（7)為何要漂洗？洗去鹽酸便于染色。
（8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么？染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。
（9）若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色，其原因是什么？
染液濃度過大或染色時(shí)間過長。
（10）為何要找分生區(qū)？分生區(qū)的特點(diǎn)是什么？能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎？為什么？
因?yàn)樵诟庵挥蟹稚鷧^(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分-裂；分生區(qū)的特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞處于分-裂狀態(tài)；不能用高倍鏡找分生區(qū)，因?yàn)楦弑剁R所觀察的實(shí)際范圍很小，難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。
（11）分生區(qū)細(xì)胞中，什么時(shí)期的細(xì)胞最多？為什么？間期；因?yàn)樵诩?xì)胞周期中，間期時(shí)間最長。
（12）所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎？為什么？
不能，因?yàn)樗^察的細(xì)胞都是停留在某一時(shí)期的死細(xì)胞。
（13）觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體？為什么？不能，因?yàn)檠笫[表皮細(xì)胞一般不分-裂。
（14）若觀察時(shí)不能看到染色體，其原因是什么？
沒有找到分生區(qū)細(xì)胞；沒有找到處于分-裂期的細(xì)胞；染液過��；染色時(shí)間過短。
實(shí)驗(yàn)一觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布
實(shí)驗(yàn)原理：DNA綠色，RNA紅色
分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中，線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色.
實(shí)驗(yàn)二物質(zhì)鑒定
還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀脂肪+蘇丹III橘黃色
脂肪+蘇丹IV紅色蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色反應(yīng)
1、還原糖的檢測(cè)
（1）材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果，梨，白蘿卜。
（2）試劑：斐林試劑（甲液：http://emrowgh.com的NaOH溶液，乙液：http://emrowgh.com的CuSO4溶液），現(xiàn)配現(xiàn)用。
（3）步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入）→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化（白色→淺藍(lán)色→磚紅色）
★模擬尿糖的檢測(cè)
1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、檢測(cè)方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙
3、結(jié)果：（用斐林試劑檢測(cè)）試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞�原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發(fā)生反應(yīng)。
2、脂肪的檢測(cè)
（1）材料的選�。汉玖吭礁叩慕M織越好，如花生的子葉。
（2）步驟：制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央
染色（滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）
制作裝片（滴1～2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片）
鏡檢鑒定（顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒）
3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)
（1）試劑：雙縮脲試劑（A液：http://emrowgh.com的NaOH溶液，B液：http://emrowgh.com的CuSO4溶液）
（2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色)
考點(diǎn)提示：
（1）常見還原性糖與非還原性糖有哪些？
葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
（2)還原性糖植物組織取材條件？
含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。
（3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？
加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。
（4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用
混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩(wěn)定。
（5)還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序?yàn)椋簻\藍(lán)色棕色磚紅色
（6）花生種子切片為何要��？只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀察
（7）轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均勻。
（8）脂肪鑒定中乙醇作用？洗去浮色。
（9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的。怎樣通過對(duì)比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈堿性；先留出一些大豆組織樣液做對(duì)比
高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)
一、生物學(xué)中常用的試劑成分及用法
成分： http://emrowgh.com NaOH(甲液)和0.05 g/mL CuSO4(乙液)。 斐林試劑：
用法： 將斐林試劑甲液和乙液等體積混合，再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液，水浴
加熱，如待測(cè)液中存在還原糖，則出現(xiàn)磚紅色沉淀。
班氏糖定性試劑： 為藍(lán)色溶液。和葡萄糖溶液混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測(cè)定。
（可保存）
雙縮脲試劑： 成分： http://emrowgh.com NaOH(A液)和http://emrowgh.com CuSO4(B液)
用法： 向待測(cè)液中先加入2 mL甲液，搖勻，再向其中加入3~4滴乙液，搖勻。
如待測(cè)中存在蛋白質(zhì)，則呈現(xiàn)紫色。
蘇丹Ⅲ： 用于檢測(cè)脂肪�？蓪⒅救境砷冱S色(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。 二苯胺： 用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色。
卡諾氏固定液： 用于細(xì)胞有絲分-裂根尖的固定
改良苯酚品紅染液： 檢測(cè)染色體，紅色
龍膽紫溶液或醋酸洋紅： 堿性染料，用于染色體染色，前者（濃度為0.01 g/mL）呈深藍(lán)
色，后者（濃度為0.02 g/mL）呈紅色
健那綠： 檢測(cè)線粒體，專一性讓線粒體染色呈藍(lán)綠色
碘液： 用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán)。
20%的肝臟研磨液、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵：
用于比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率。（新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶） 3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液：
用于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)。
碘液： 用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán) 丙酮： 用于提取葉綠體中的色素 層析液： 成分： 20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93號(hào)汽油
用途： 可用于色素的層析，即將色素在濾紙上分離開。
SiO2 ： 在色素的提取的分離實(shí)驗(yàn)中研磨綠色葉片時(shí)加入，可使研磨充分。 CaCO3 ： 研磨綠色葉片時(shí)加入，可中和有機(jī)酸，防止在研磨時(shí)葉綠體中
的色素受破壞。
蔗糖溶液： 0.3 g/mL的蔗糖溶液相當(dāng)于30%的蔗糖溶液，比植物細(xì)胞液的濃度大， 可用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。
MS固體培養(yǎng)基成分
0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液： 與雞血混合，防凝血
①可用于溶解DNA。當(dāng)氯化鈉濃度為2 mol/L、 0.015 mol/L
時(shí)DNA的溶解度最高，在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時(shí)，DNA溶解度最最低。
②濃度為0.9%時(shí)可作為生理鹽水。
秋水仙素： 人工誘導(dǎo)多倍體試劑。用于萌發(fā)的種子或幼苗，可使染色體組
加倍，原理是可抑制正在分-裂的細(xì)胞紡錘體的形成。
酒精
（1）體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精 ： 在脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中
洗去浮色。
（2）體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精 ：
①觀察植物細(xì)胞的有絲分-裂（或低溫誘導(dǎo)染色體加倍）實(shí)驗(yàn)
作用：解離：用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的
酒精1∶1混合 能使組織中的細(xì)胞相互分離開來 ②DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)
作用：析出提取含雜質(zhì)較少的DNA
原因：DNA不溶于冷酒精，而細(xì)胞中的某些物質(zhì)可以溶解于酒精
（3）體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精
（4）無水酒精
作用：葉綠體中色素的提取與分離實(shí)驗(yàn)
（5）用于綠葉脫色（鑒定光合作用產(chǎn)物——淀粉時(shí)） 作用：微生物的培養(yǎng)技術(shù) 消毒殺菌 氯化鈉溶液：
改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞 ，同時(shí)使染色體中的DNA與8% ： 蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合
HCl 15%： 有絲分-裂、低溫誘導(dǎo)染色體加倍實(shí)驗(yàn)
調(diào)節(jié)溶液pH
重鉻酸鉀溶液： 檢測(cè)酒精，橙色→灰綠色
溴麝香草酚藍(lán)水溶液： 檢測(cè)CO2，由藍(lán)變綠再變黃 Ca(OH)2：甲基綠： 對(duì)DNA 進(jìn)行染色（綠色）
吡羅紅： 對(duì) RNA進(jìn)行染色（紅色）
伊紅美藍(lán)： 鑒定有無大腸桿菌的存在
NaOH： 用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H
NaHCO3： 提供CO2
瓊脂： 激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基
亞甲基藍(lán)： 用于檢測(cè)污水的細(xì)菌含量
剛果紅： 檢測(cè)纖維素分解菌的存在
酚酞溶液： 酸堿指示劑，用于顯示NaOH滲透入瓊脂塊的深度。 果膠酶： 水解植物細(xì)胞壁的果膠層，以增加果汁的產(chǎn)量和澄清度
檢測(cè)CO2 【補(bǔ)充完善】
【補(bǔ)充完善】
【補(bǔ)充完善】
四、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法
1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水 3、除去容器中CO2——NaOH溶液 4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境 5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱 6、除去光合對(duì)呼吸干擾——給植株遮光
7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光 8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉 9、線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心 10、骨無機(jī)鹽的除去——鹽酸溶液
11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒;實(shí)驗(yàn)室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌;整個(gè)過程都在實(shí)驗(yàn)室無菌區(qū)或酒精燈旁進(jìn)行。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法
①光合速度——O2釋放量或CO2吸收量或有機(jī)物生成量 ◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率;
◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時(shí)間內(nèi)上浮的葉片數(shù)目; ◆植物體上的葉片可依指示劑(如碘液)處理后葉片顏色深淺。 ②呼吸速度——O2吸收量或CO2釋放量或有機(jī)物消耗量 ③原子或分子轉(zhuǎn)移途徑——放射性同位素示蹤 ④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離 ⑤植物細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素—?jiǎng)游锖难趿?發(fā)育速度等 ⑦生長激素—生長速度(體重、體長變化) ⑧胰島素作用—?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài)
⑨菌量—菌落數(shù)，亞甲基藍(lán)褪色程度 六、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法
1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱 2、酶促反應(yīng)——水浴保溫
3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、 4、細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng) 七、一些常見的實(shí)驗(yàn)方法
⑴、根據(jù)顏色來確定某種物質(zhì)的存在：
淀粉+I2(藍(lán)色);還原性糖+斐林試劑(磚紅色);脂肪+蘇丹Ⅲ(橘黃)或+蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑(紫色);
大腸桿菌+伊紅和美藍(lán)(菌落為深紫色，有金屬光澤) ⑵、用顏色標(biāo)記法來確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。 ⑶、用熒光標(biāo)記法來證明細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性 ⑷、同位素示蹤法：
1、用放射性元素35S、 32P分別標(biāo)記噬菌體，可驗(yàn)證噬菌體侵染細(xì)菌的過程， DNA分子能保持連續(xù)性，從而說明DNA是生物的遺傳物質(zhì)。
2、用放射性元素15N標(biāo)記研究DNA的復(fù)制過程，可說明DNA具有半保留復(fù)制 的特點(diǎn)
3、用3H標(biāo)記氨基酸，可以研究氨基酸在細(xì)胞內(nèi)合成分泌蛋白所經(jīng)途徑： 氨基酸→核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→經(jīng)細(xì)胞膜分泌到細(xì)胞外 4、用放射性元素18O研究光合作用釋放的氧氣來自H2O ： H218O+CO2→18O2 H2O+C18O2→O2
5、用放射性元素14C研究光合作用中碳的同化途徑 14
CO2→C3→C6H12O6
6、用放射性元素32P標(biāo)記胸腺嘧啶可研究DNA的合成去向及細(xì)胞分-裂的情況 7、用放射性元素32P標(biāo)記尿嘧啶可研究RNA的合成去向及蛋白質(zhì)的合成情況
⑸、確定某種元素為植物生長必需的元素的方法: 水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對(duì)照) ⑹、獲得無籽果實(shí)的方法:
用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房，如無籽蕃茄、 誘導(dǎo)染色體變異，如無籽西瓜。 ⑺、確定某種激素功能的方法：
飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。 ⑻、確定傳入、傳出神經(jīng)的功能：
刺激+觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測(cè)定神經(jīng)上的電位變化。 ⑼、植物雜交的方法
雌雄同花：花蕾期去雄+套袋 +開花期人工授粉+套袋 雌雄異花：花蕾期雌花套袋+開花期人工授粉+套袋 ⑽、確定某一顯性個(gè)體基因型的方法： 測(cè)交; 該顯性個(gè)體自交。
⑾、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法： 具有一對(duì)相對(duì)性狀的純合體的雜交 自交，觀察后代是否有性狀分離。
⑿、確定某一個(gè)體是否具有抗性基因的方法：
確定小麥?zhǔn)欠窬哂锌逛P病基因，用銹病菌去侵染，一段時(shí)間后，觀察有無銹斑出現(xiàn)。 ⒀、鑒定血型的方法：
用標(biāo)準(zhǔn)血清與待測(cè)血型混合，在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。 ⒁、育種的方法：
雜交育種;人工誘變育種;單倍體育種;基因工程育種;細(xì)胞工程育種;多倍體育種等。 ⒂、測(cè)定種群密度的方法：樣方法; 標(biāo)志重捕法 ⒃、生態(tài)瓶的制作方法;瓶必須透明，且封閉 ⒄、分離微生物的方法：
平板劃線法;用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)(如：圓褐固氮菌的分離，金黃色葡萄球菌的分離，細(xì)菌和酵母菌的分離)
⒅、測(cè)定微生物群體生長的方法： 測(cè)定細(xì)菌的數(shù)目---顯微計(jì)數(shù)
測(cè)定細(xì)菌的重量---取一定體積的培養(yǎng)基，經(jīng)離心分離，反復(fù)洗滌后，稱濕重，或烘干后稱干重。 七、實(shí)驗(yàn)研究方法
1、顯微觀察法 如觀察植物細(xì)胞有絲分-裂的實(shí)驗(yàn)，觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)。 2、觀察法 觀察微生物的外在性狀和表現(xiàn)等，如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動(dòng)狀況，觀察動(dòng)物的毛色和植物花色的遺傳實(shí)驗(yàn)等。 3、同位素示蹤法 如噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實(shí)驗(yàn)等。
4、加法創(chuàng)意 如用飼喂法研究甲狀腺激素的實(shí)驗(yàn)、用注射法研究生長激素的實(shí)驗(yàn)，用移植法研究性激素的實(shí)驗(yàn)等。
5、減法創(chuàng)意 如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長激素的實(shí)驗(yàn)，雌蕊授粉后除去發(fā)育著的種子實(shí)驗(yàn)等。
6、雜交實(shí)驗(yàn)法 如孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測(cè)交的實(shí)驗(yàn)，小麥的雜交實(shí)驗(yàn)等。 7、化學(xué)分析法 如番茄和水稻對(duì)Ca 和Si選擇吸收的實(shí)驗(yàn)，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)等。 8、理論分析法 如大小草履蟲競(jìng)爭的實(shí)驗(yàn)，植物根向地生長、莖背地生長的實(shí)驗(yàn)，植物向光性的實(shí)驗(yàn)等。
9、模擬實(shí)驗(yàn)法 如滲透作用的實(shí)驗(yàn)裝置，分離定律的模擬實(shí)驗(yàn)等。 八、實(shí)驗(yàn)技術(shù)
1、光學(xué)顯微鏡的使用
適用于觀察生物的微觀結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，包括光鏡下可看到的各種細(xì)胞器。 2、臨時(shí)裝片、切片和涂片的制作技術(shù)
適用于顯微觀察，凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時(shí)裝片、切片或涂片。如“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)”中要制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片，在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。 3、研磨和過濾技術(shù)
適用于從生物組織中提取物質(zhì)，如酶、色素等。研磨時(shí)要先將生物材料切碎，然后加入研磨劑〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物質(zhì)，充分研磨后，往往要進(jìn)行過濾，以除去濾渣，所用過濾器具則根據(jù)需要或或根據(jù)試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。 4、解離技術(shù)
用于破壞細(xì)胞壁，分散植物細(xì)胞，制作臨時(shí)裝片。 5、恒溫技術(shù)
適用于有酶參加的生化反應(yīng)，一般用水浴或恒溫箱。根據(jù)題目要求選用。 6、紙層析技術(shù)
適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫濾液細(xì)線、層析分離。 7、根尖培養(yǎng)技術(shù) 觀察植物根尖有絲分-裂的實(shí)驗(yàn) 8、溶液培養(yǎng)法 探究植物必需的礦質(zhì)元素的實(shí)驗(yàn)，〈拓展——微生物生長因子的判斷的實(shí)驗(yàn)〉;植物的無土栽培〈注意溶液濃度和溶解氧〉。
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