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2017年初級西藥師考試知識點：巨噬細(xì)胞
導(dǎo)語：巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞容易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。我們一起來看看相關(guān)的考試知識吧。
單核細(xì)胞及由單核細(xì)胞演變而來的具有吞噬功能的巨噬細(xì)胞，稱為單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)。單核細(xì)胞發(fā)生于骨髓的多能干細(xì)胞，循環(huán)于血液中，穿透血管內(nèi)皮進(jìn)入組織內(nèi)，轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞。單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)在體內(nèi)分布廣，細(xì)胞數(shù)量多，主要分布于疏松結(jié)締組織、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓、腦、肺以及腹膜等處，并依其所在組織的不同而有不同的名稱。
單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞有很強(qiáng)的吞噬能力，能吞噬異物、細(xì)菌、衰老和突變的細(xì)胞等。此外，也吞噬抗原抗體復(fù)合物，并參與脂質(zhì)與膽固醇代謝，可吞噬和蓄積脂質(zhì)。吞噬的生理意義在于消除體內(nèi)不需要的物質(zhì)，其中巨噬細(xì)胞與淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞，在功能上，有互相促進(jìn)和互相抑制的作用。當(dāng)單核吞噬細(xì)胞系的生理功能失調(diào)時，可引起多種疾病。
培養(yǎng)方法
巨噬細(xì)胞也建有無限細(xì)胞系，大多來自小鼠，如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等，均獲惡性，培養(yǎng)中呈巨噬細(xì)胞形態(tài)和吞噬功能，易于傳代和瓶壁分離，但難以建株。培養(yǎng)巨噬細(xì)胞可用各樣方法和各種來源來獲取細(xì)胞，以小鼠腹腔取材法最為實用，其法如下：
1、實驗前三天，向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。
2、引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3～5秒。
3、置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè)，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。
4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側(cè)用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內(nèi)充分流動。
5、用針頭輕輕挑起腹壁，使動物體微傾向一側(cè)，使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內(nèi)。
6、小心拔出針頭，把液體注入離心管中，250g4℃離心10分鐘，去上清，加10mlEagle培養(yǎng)基。
7、計數(shù)細(xì)胞，每只小鼠可產(chǎn)生20～30×105細(xì)胞，其中90%為巨噬細(xì)胞。
8、為獲取3×105帖附細(xì)胞/平方厘米，需接種2.5×106/ml。
9、為純化培養(yǎng)細(xì)胞，去除其它白細(xì)胞，接種數(shù)小時后，去除培養(yǎng)液，用Eagle液沖洗1～2次后，再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃，5%CO2溫箱中培養(yǎng)。
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