風(fēng)濕病的檢驗(yàn)知識(shí)
五、抗線粒體抗體(Antimitochondrial antibody,AMA)
AMA是以細(xì)胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無(wú)器官和種屬特異性。一般采用大鼠腎及胃作為抗原基質(zhì)，采用IFA檢測(cè)，陽(yáng)性可見(jiàn)大鼠腎和胃的細(xì)胞漿呈現(xiàn)細(xì)顆粒狀熒光。
采用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應(yīng)分為從M1到M9九種類型，高效價(jià)的M2和M9型自身抗原與原發(fā)性膽汁性肝硬變相關(guān)。目前已有檢測(cè)M2的ELISA試劑盒供應(yīng)。
〖參考值〗 陰性 >1：10 為陽(yáng)性
〖臨床意義〗
AMA是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標(biāo)記抗體，陽(yáng)性率達(dá)90%，并且50%患者抗體效價(jià)達(dá)1：1280或更高。此外，也可見(jiàn)于慢性活動(dòng)性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個(gè)指標(biāo)。正常人中陽(yáng)性率<10%，且效價(jià)較低。
六.抗平滑肌抗體(Antismooth muscle antibody，ASMA )
ASMA是抗肝細(xì)胞膜上一種肌動(dòng)球蛋白的自身抗體。這種肌動(dòng)球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應(yīng)。一般采用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質(zhì)，陽(yáng)性可見(jiàn)胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。
〖參考值〗 陰性，>1：10為陽(yáng)性
〖臨床意義〗
主要見(jiàn)于明顯活動(dòng)期的自身免疫性肝炎患者，陽(yáng)性率在80%以上，效價(jià) 在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽(yáng)性，且早于 HBsAg出現(xiàn)。其他疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽(yáng)性率。正常人中僅有2%陽(yáng)性。
七. 抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)
ATGA 是由甲狀腺炎引起的自身抗體 ，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無(wú)種屬特異性。ATMA 的抗原是甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)的脂蛋白。常用檢測(cè)方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。
〖參考值〗
IHA： 血清效價(jià) ≤1：32， >1：32為陽(yáng)性，ATGA 和ATMA
ELISA：正常為陰性，P/N < 2.1，>2.1 為陽(yáng)性, ATGA 和 ATMA
RIA：ATGA<30%;ATMA <15%
l〖臨床意義〗
主要見(jiàn)于橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見(jiàn)于甲狀腺瘤、惡性貧血、重癥肌無(wú)力、Edison 病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽(yáng)性率。
正常人也可檢出這兩種抗體 ，并且隨著年齡的增長(zhǎng)，陽(yáng)性率增加，特別是40歲以上婦女，可達(dá)18%左右。
應(yīng)該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽(yáng)性，因此兩種抗體同時(shí)檢測(cè)可提高抗甲狀腺自身抗體的`檢出水平。
八. HLA-B27測(cè)定
HLA-B27 抗原為人類MHC I類 抗原B位點(diǎn)的表達(dá)產(chǎn)物，可分為幾種亞型。HLA -B27的檢測(cè)方法有多種，補(bǔ)體依賴性微量細(xì)胞毒法(CDMA);流式細(xì)胞儀法;玫瑰花法;ELISA法;等電聚焦法等。近來(lái)應(yīng)用PCR法檢測(cè)HLA-B27，敏感而特異，并且可進(jìn)行B27亞型的分析。
l〖參考值〗
非洲-美洲人：3-4%;l 高家索人：6-8%;l 亞洲人：1%。
〖臨床意義〗
強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27陽(yáng)性率為90-95%。大約42%的青年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(JRA)存在HLA-B27，Reiters 綜合征患者陽(yáng)性率大約79%。此外，腸病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病性關(guān)節(jié)炎也有一定的陽(yáng)性率。RA病人陽(yáng)性率不高。
〖注意事項(xiàng)〗
在評(píng)價(jià)HLA-B27陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合考慮，不能單純依靠此結(jié)果作出診斷。
其他免疫指標(biāo)及檢測(cè)
C反應(yīng)蛋白(C-Reactive Protein，CRP )
CRP是一種急性時(shí)相蛋白，由肝細(xì)胞合成，可與肺炎球菌細(xì)胞壁C多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)，故稱CRP。在各種炎癥的急性期或組織創(chuàng)傷時(shí)，血清CRP濃度急劇升高。CRP不僅可結(jié)合多種細(xì)菌( bacteria ),真菌(fungi)及原蟲(protozoal)體內(nèi)的多糖物質(zhì)，而且在鈣離子存在下，還可以結(jié)合磷脂酰膽堿和核酸。結(jié)合后的復(fù)合體具有激活補(bǔ)體(complement)的作用�！紖⒖贾怠�<8mg/L
〖臨床意義〗
血清CRP 升高多見(jiàn)于：急性、慢性細(xì)菌感染;組織損傷壞死;急性心肌梗死;各種炎癥;外科手術(shù);腫瘤浸潤(rùn);急性風(fēng)濕熱和活動(dòng)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細(xì)菌性感染的鑒別指標(biāo)。
〖注意事項(xiàng)〗
CRP測(cè)定方法不同，在判定結(jié)果時(shí)應(yīng)予考慮。此外，雌激素、口服避孕藥可使CRP增高，皮質(zhì)激素和抗炎藥可使CRP下降。
類風(fēng)濕因子(Rheumatoid Factor，RF)
RF是一種自身抗體，可與變性的IgG發(fā)生反應(yīng)，與IgG 的Fc段結(jié)合。RF可分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集試驗(yàn)檢測(cè)的主要為IgM型RF。RF主要見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis RA)，也可見(jiàn)于其他結(jié)締組織病及其他疾病。檢測(cè)方法有乳膠凝集試驗(yàn)、致敏羊紅細(xì)胞凝集法、速率散射比濁法、ELISA法等。
〖參考值〗
乳膠法：陰性或<1：20 速率散射比濁法：<30IU/ml
〖臨床意義〗
RF見(jiàn)于90%以上的RA病人，效價(jià)常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所檢測(cè)的大部分是IgM-RF。
關(guān)于RF分型，臨床應(yīng)用尚不廣泛。多數(shù)作者認(rèn)為：IgM-RF效價(jià)高低可在一定程度上反映RA的活動(dòng)性，但無(wú)明確的密切關(guān)系;IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀密切相關(guān);IgA-RF見(jiàn)于RA、硬皮病、Felty綜合征和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus， SLE)，也是RA臨床活動(dòng)性的一個(gè)指標(biāo);IgE-RF 除RA患者外，也見(jiàn)于Felty綜合征和青年型RA。高水平 IgM-RF陽(yáng)性病人預(yù)后較差。
從早期RA患者的X線片分析，IgM-RF持續(xù)陽(yáng)性的病人更易發(fā)生骨侵蝕。IgA-RF在SS病人中陽(yáng)性率較高;IgE-RF在惡性關(guān)節(jié)炎病人中陽(yáng)性率較高。在RA病人，高效價(jià)RF存在并伴有嚴(yán)重的關(guān)節(jié)功能受限時(shí)，常提示預(yù)后不良。
〖注意事項(xiàng)〗
正常人也可有4%左右的陽(yáng)性率。隨年齡增加，RF的檢出率會(huì)增加。RA病人RF也可陰性，不能單純依靠RF陽(yáng)性來(lái)診斷RA。RF還可見(jiàn)于其它多種疾病，其中最常見(jiàn)的是干燥綜合征(S.S)， 發(fā)生率在90%以上，且含量一般較高。其它常見(jiàn)的RF陽(yáng)性的疾病有： SLE、系統(tǒng)性硬化癥、高球蛋白血癥、結(jié)節(jié)病、梅毒、麻風(fēng)、病毒感染、肝硬化等等。有些效價(jià)可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解釋結(jié)果時(shí)應(yīng)予注意。
冷球蛋白(Cryoglobulin CG，)
冷球蛋白是一種球蛋白，4℃時(shí)發(fā)生沉淀，30 ℃易聚合，37℃又溶解。CG分為三類：
1.I型(單克隆型)：大多為IgM或IgG 型，無(wú)抗補(bǔ)體作用。
2.II型(混合型)：兩種或兩種以上單克隆Ig混合，以IgM+IgG最常見(jiàn)，也可見(jiàn)IgA+ IgG;IgG+IgM+IgA等。有抗補(bǔ)體作用。
3. III型(多克隆型)： 沒(méi)有單克隆蛋白。
其檢測(cè)方法有血球壓積管法(定性)和分光光度計(jì)法(定量)。
〖參考值〗 定性法：陰性 定量法：<80μg/ml。
〖臨床意義〗
SLE 病人血清中可出現(xiàn)混合型CG。在血管炎、腎小球腎炎、淋巴細(xì)胞增生性疾病也可陽(yáng)性。在巨球蛋白血癥或多發(fā)性骨髓瘤病人伴雷諾氏現(xiàn)象時(shí)與I型冷球蛋白血癥有關(guān)。 II型冷球蛋白血癥與自身免疫病例如血管炎、腎小球腎炎、SLE、RA 和 SS 有關(guān)。在某些感染如肝炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、巨細(xì)胞病毒感染和弓形蟲病也可出現(xiàn)。
小結(jié):
胞漿抗體
Hep-2細(xì)胞具有許多胞漿抗原。如有特異性胞漿抗體存在，可出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性胞漿熒光。包括抗線粒體抗體(AMA)、抗核糖體抗體、抗肌動(dòng)蛋白抗體即抗平滑肌抗體(ASMA)、抗高爾基體抗體、抗絲抗體(如Vimentin)。一般最有意義的是AMA和ASMA，可是熒光染色Hep2細(xì)胞卻不能鑒定這兩種抗體，可應(yīng)用鼠腎和鼠胃切片作進(jìn)一步分析。
系統(tǒng)性風(fēng)濕病活動(dòng)期的評(píng)價(jià)
自身抗體檢測(cè)以診斷全身性疾病比監(jiān)測(cè)該病活動(dòng)更有意義。但抗dsDNA抗體效價(jià)卻與活動(dòng)性有關(guān)。應(yīng)定期檢測(cè)抗dsDNA抗體的效價(jià)及C3、C4的含量。以及測(cè)定循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)的含量。ESR和CRP在炎癥反應(yīng)時(shí)常常升高。RA病情加重時(shí)，CRP明顯增高。SLE活動(dòng)期，CRP一般正常。
器官特異性自身免疫性疾病
組織抗體
許多自身抗體可采用IFA測(cè)定，用鼠腎和胃的切片能測(cè)出抗線粒體、平滑肌、肝腎微粒體和胃壁細(xì)胞的抗體。甲狀腺組織切片可測(cè)定抗甲狀腺自身抗體。
自身免疫性肝病
在肝臟病變中，ANA陽(yáng)性率可達(dá)40-80%�？咕�粒體抗體(AMA)與原發(fā)性膽汁性肝硬變有關(guān)。特別是高效價(jià)的M2和M9線粒體抗原。
約一半的自身免疫性肝炎的病人有較高效價(jià)的ASMA。此外，肝腎微粒體抗體(LKMAs)，抗可溶性肝抗原(SLA)抗體，抗肝細(xì)胞膜抗體等也可用于自身免疫性肝病診斷和監(jiān)測(cè)。
其他
腎臟疾病常測(cè)定的抗體有抗dsDNA抗體，抗腎小球基底膜抗體等，還可測(cè)定CIC，以及作腎組織活檢進(jìn)行熒光染色。
韋格納肉芽腫病是一種發(fā)生于上下呼吸道的壞死性血管炎，也累及腎臟，病人常死于腎和肺衰竭。檢查抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCAs)是診斷指標(biāo)之一。也可通過(guò)ELISA測(cè)定抗髓過(guò)氧化物酶抗體，抗蛋白酶3抗體，有助于診斷和鑒別診斷。
胃腸道疾病中，惡性貧血與抗胃壁自身抗體有關(guān)，與抗內(nèi)因子抗體的相關(guān)性達(dá)75%�？挂葝u細(xì)胞抗體(ICAs)，抗谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)與I型糖尿病有一定關(guān)系。重癥肌無(wú)力病人可出現(xiàn)抗骨骼肌抗體。多發(fā)性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗體�？剐募】贵w常見(jiàn)于心肌梗死、心臟手術(shù)或心肌損傷后。
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