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衛(wèi)生資格《檢驗(yàn)技士》預(yù)習(xí)資料:免疫濁度法
誤差和不確定度
區(qū)分誤差和不確定度很重要,因?yàn)檎`差定義為:被測(cè)量的單位結(jié)果和真值之差。
由于真值往往不知道,故誤差是一個(gè)理想的概念,不可能被確切地知道。
但不確定度是可以一個(gè)區(qū)間的形式表示,如果是為一個(gè)分析過(guò)程和所規(guī)定樣品類型做評(píng)估時(shí),可適用于其所描述的所有測(cè)量值。
因此,測(cè)量誤差與測(cè)量不確定度無(wú)論從定義、評(píng)定方法、合成方法、表達(dá)形式、分量的分類等方面均有區(qū)別。
免疫濁度法原理
當(dāng)可溶性抗原與相應(yīng)抗體在兩者比例合適時(shí),抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度,如形成的復(fù)合物增加,反應(yīng)液的濁度隨之增加,與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照,即可計(jì)算出受檢物的含量。
按照儀器設(shè)計(jì)的不同分為透射比濁儀測(cè)定法和散射比濁儀測(cè)定法。測(cè)定方法又可分為速率法和終點(diǎn)法。
凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)
凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)是利用可溶性抗原和相應(yīng)抗體在凝膠內(nèi)擴(kuò)散,形成濃度梯度,在抗原與抗體濃度比例恰當(dāng)?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢?jiàn)的沉淀線或沉淀環(huán)。
凝膠支持物的種類:凝膠支持物的種類有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝膠等。不同分子量的物質(zhì)在凝膠中擴(kuò)散速度不同,藉此可用以識(shí)別不同待測(cè)物分子量的差別。
免疫電泳技術(shù)原理
免疫電泳技術(shù)實(shí)質(zhì)上是在直流電場(chǎng)作用下的凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)。它的原理是將凝膠擴(kuò)散置于直流電場(chǎng)中,在一定的條件下,抗原及抗體離解成為帶正電或負(fù)電的電子,在電場(chǎng)中向異相電荷的電極移動(dòng),所帶凈電荷量越多、顆粒越小,泳動(dòng)速度越快,反之則慢。由于電流加速了抗原、抗體的運(yùn)行速度,縮短了兩者結(jié)合的時(shí)間,加快了沉淀現(xiàn)象的產(chǎn)生。當(dāng)有多種帶電荷的物質(zhì)電泳時(shí),由于靜電荷不同,而區(qū)分成不同區(qū)帶,使抗原決定簇不同的成分得以區(qū)分。
影響因素有:①電場(chǎng)強(qiáng)度;②溶液pH;③離子強(qiáng)度;④電滲等。
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