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臨床醫(yī)學(xué)檢驗技士備考資料:溶血反應(yīng)的檢測試劑
為貫徹國家人事部、衛(wèi)生部《關(guān)于加強(qiáng)衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)職務(wù)評聘工作的通知》等相關(guān)文件的精神,自2001年全國衛(wèi)生專業(yè)初、中級技術(shù)資格以考代評工作正式實施。通過考試取得的資格代表了相應(yīng)級別技術(shù)職務(wù)要求的水平與能力,作為單位聘任相應(yīng)技術(shù)職務(wù)的必要依據(jù)。下面是小編整理的臨床醫(yī)學(xué)檢驗技士備考資料:溶血反應(yīng)的檢測試劑,歡迎閱讀!
溶血反應(yīng)的檢測試劑
(一)補(bǔ)體
檢測血清補(bǔ)體水平或補(bǔ)體活性時需要從受檢者采血及分離血清。做補(bǔ)體結(jié)合試驗時多采用豚鼠血清作為實驗用補(bǔ)體的來源。因為補(bǔ)體在體外極易衰變,所以檢測補(bǔ)體活性的血清標(biāo)本和作為補(bǔ)體試劑的血清必須新鮮。
受檢者一般做靜脈采血,在動物可做心臟采血。血清分離后應(yīng)及時使用,最好在當(dāng)日用完。必須保存時采用小量分裝的辦法,置-70℃下可保存數(shù)月,避免反復(fù)凍融。凍干制品可長期保存,但其活性都不同程度地比新鮮血清降低。
以豚鼠血清作補(bǔ)體來源時,應(yīng)考慮到個體差異。為了確保血清中補(bǔ)體的有效活性,必須取3只以上豚鼠的血清混合后使用。
(二)綿羊紅細(xì)胞
從綿羊頸靜脈無菌采血,抽出血液后立即小心地注入放有玻璃珠的無菌干燥三角燒瓶中,充分旋搖15~20min,以除去纖維蛋白。也可將羊血與等量或2倍量的Alsever血液保存液混合,既有抗凝作用,又適于儲存;分裝后置4℃,可使用3周。
實驗前,取適量抗凝血,加入8~10倍的生理鹽水,輕輕混勻后2000r/min離心5min;棄上清,沉淀的紅細(xì)胞用生理鹽水再洗一次,這時上清為無色澄清,如顯紅色說明有溶血現(xiàn)象,應(yīng)更換新鮮羊血;第三次用緩沖液洗滌,棄上清,取壓積紅細(xì)胞用緩沖液配制SRBC懸液,使用濃度一般為2%~5%。為使紅細(xì)胞濃度標(biāo)準(zhǔn)化,可吸取少量紅細(xì)胞懸液,中入20~30倍的稀釋液中,在542nm波長比濁,以吸光度為標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整紅細(xì)胞濃度。
(三)溶血素
溶血素即抗綿羊紅細(xì)胞抗體,多是以綿羊紅細(xì)胞免疫家兔而得到兔抗血清。一般沒有必要進(jìn)一步提純抗體,但在試驗前需先進(jìn)行加熱56℃30min或60℃3min以滅活補(bǔ)體。
由于補(bǔ)體溶血試驗及補(bǔ)體結(jié)合試驗均是比較精密的試驗,其結(jié)果與溶血素的效價有關(guān),所以試驗需要滴定溶血素效價;在制備抗血清的過程中,于動物采血前和分離抗血清后也需要滴定溶血素效價。
1.溶血素稀釋稀釋溶血素時,要先對效價有個大概的估計,以便確定稀釋度的范圍。動物采血前滴定時稀釋范圍要稍大些,實驗前的滴定便以原先的記錄作為參考(溶血素的效價多在數(shù)千單位以上)。溶血素稀釋一般不采用連續(xù)倍比稀釋法,因為稀釋到最后時跨度太大,不容易確定單位。為了便于操作,現(xiàn)舉例按表14-1配制不同稀釋度的溶血素。
2.效價滴定將稀釋好的溶血素及其他試劑按表14-2所示逐步加入到各試管中,放置37℃水浴,不要蓋上水浴箱的蓋子,以免蓋子上冷凝的水蒸氣滴入試管內(nèi)引起非補(bǔ)體性溶血。30min后取出觀察結(jié)果。
溫育反應(yīng)后,完全溶血的試管內(nèi)液體紅色透明,放置一段時間后管底無細(xì)胞沉淀,離心后可見少許細(xì)胞碎渣。不溶血的管內(nèi)液體渾濁;放置后可見紅細(xì)胞沉淀,上清無色透明。不同程度的不完全溶血介于兩者的中間變化態(tài)。
按照以上標(biāo)準(zhǔn),以產(chǎn)生完全溶血的最高稀釋管為最大有效反應(yīng)管,以該管的溶血素稀釋倍數(shù)為溶血素產(chǎn)效價。例如表14-2中的溶血素效價應(yīng)為1:4000;在1:4000稀釋的情況下,反應(yīng)液中所含溶血素的的量為1U/ml。
做補(bǔ)體活性測定或補(bǔ)體結(jié)合試驗時,一般使用2U/ml溶血素(在本例做1:2000稀釋),與SRBC懸液等體積混合。
(四)稀釋緩沖液
磷酸緩沖液或巴比妥緩沖液等均可用于溶血試驗,pH值應(yīng)調(diào)至7.2~7.4之間。另加入適量氯化鈉以保持等滲,并適當(dāng)?shù)丶尤胍恍┾}離子和鎂離子,這是補(bǔ)體活化所不可缺少的。有的配方還加入0.1%的明膠以使蛋白溶液穩(wěn)定;加入0.01%NaN3可以防腐,利于較長時間保存。
基礎(chǔ)知識篇
1.屬于血液中正常有形成分的是血小板
2.不屬于臨床血液學(xué)研究內(nèi)容的是淋巴細(xì)胞的分化和發(fā)育
3.正常人血液 PH 應(yīng)該在7.35~7.45
4.血漿滲透壓量正常人約為290~310mOsm/( kg ·H20)
5.血液的主要生理功能包括:運(yùn)輸、協(xié)調(diào)、防御、維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等功能
6.在必要時,成人靜脈采血的部位可選擇股靜脈
7.皮膚采血的特點是耳垂采血檢查結(jié)果不夠恒定
8.真空采血法又稱為負(fù)壓采血法
9.屬于酸性染料的是伊紅
10.關(guān)于細(xì)胞成分化學(xué)特性,敘述正確的是血紅蛋白為堿性蛋白質(zhì)
11.晚幼紅細(xì)胞脫核成網(wǎng)織紅細(xì)胞的過程是完成在骨髓
12.關(guān)于紅細(xì)胞生理,描述正確的是紅細(xì)胞有交換和攜帶氣體的功能
13.毎克血紅蛋白可攜帶氧氣為1.34ml
14.新生兒紅細(xì)胞計數(shù)的參考值(6.0~7.0) X 1012幾 L
15.紅細(xì)胞 Hayem 稀釋液中硫酸鈉的主要作用是提高比密防止細(xì)胞粘連
16.枸櫞酸鈉在枸櫞酸鈉稀釋液中的主要作用是抗凝和維持滲透壓
17.1966年被 ICSH 推薦的血紅蛋白檢測參考方法是 HiCN
18.改良牛鮑計數(shù)板兩側(cè)支柱加蓋專用蓋玻片形成的計數(shù)池高為0.10mm
19.HiCN測定最大吸收峰位于540nm
20.HiN3檢測的最大吸收峰位于542nm
21.正常情況下,外周血中的血紅蛋白主要是氧合血紅蛋白
22.瑞氏染色血涂片中,正常紅細(xì)胞直徑范圍在6.0~9.5um
23.大4細(xì)胞是指4細(xì)胞自>10um
24.關(guān)于嗜多色性紅細(xì)胞敘述正確的是胞質(zhì)內(nèi)尚存少量嗜堿性物質(zhì)
25.血細(xì)胞比容測定 ICSH 確定的參考方法是放射性核素法
26.溫氏法測定血細(xì)胞比容其結(jié)果應(yīng)讀取紅細(xì)胞柱還原紅細(xì)胞層
27.對血細(xì)胞比容敘述正確的是作為 MCV 計算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)
28.對紅細(xì)胞平均指數(shù)敘述正確的是 MCHC 的計算單位是 gL
29.RDW反映紅細(xì)胞的體積大小的異質(zhì)性
30.對紅細(xì)胞體積分布寬度敘述正確的是 RDW 可作為 IDA 的篩選診斷指標(biāo)
31.標(biāo)本中可影響 RDW 的因素是紅細(xì)胞碎片
32.有關(guān)網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理敘述錯誤的是經(jīng)普魯士藍(lán)染色后可見連成線狀的網(wǎng)狀結(jié)4
33.ICSH推薦的血沉檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法為魏氏法
34.魏氏法檢測血沉所采用的數(shù)值報告單位是 mm / h
35.在機(jī)體防御和抵抗病原菌過程中起主要作用的外周血中的細(xì)胞是中性粒細(xì)胞
36.正常狀態(tài)下衰老的中性粒細(xì)胞主要被破壞所在的系統(tǒng)是單核﹣吞噬細(xì)胞系統(tǒng)
37.在白細(xì)胞成熟過程中,最早出現(xiàn)特異性顆粒的細(xì)胞是中幼粒細(xì)胞
38.與白細(xì)胞無關(guān)的是 Howell - Jolly 小體
39.正常生理情況下,關(guān)于白細(xì)胞變化規(guī)律的正確敘述是早晨較低,下午較高
40.正常情況下,血涂片經(jīng)染色后中性粒細(xì)胞核象最多見的是三葉核
41.從原始粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞到中幼粒細(xì)胞均有合成 DNA 的能力,這類粒細(xì)胞應(yīng)屬于分裂池
42.血液分析儀敘述正確的是儀器法對白細(xì)胞的分類不能替代顯微鏡分類
43.在電阻抗法中,與脈沖大小呈正相關(guān)的是細(xì)胞體積
44.目前血型的定義是指抗原抗體系統(tǒng)的遺傳特性
45.ISBT將紅細(xì)胞表面抗原按血型系統(tǒng)分為23個
46.紅細(xì)胞膜上的 ABH 抗原主要構(gòu)成物質(zhì)是糖蛋白和糖脂
47.酶介質(zhì)法作血型鑒定時,用蛋白酶處理紅細(xì)胞,主要是破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸,使紅細(xì)胞表面負(fù)電荷減少
48.原尿中不存在的物質(zhì)是紅細(xì)胞
49.原尿中的葡萄糖被完全重吸收的場所是近曲小管
50.原尿中肌酐幾乎不被重吸收而隨尿排出體外
51.腎單位不包括集合管
52.少尿是指24h尿量少于400ml
53.成年人正常尿量為1000~2000ml/24h
54.鏡下膿尿為每高倍視野尿白細(xì)胞>5個
55.小圓上皮細(xì)胞主要是指底層稱移行上皮細(xì)胞
56.屬于尿中異型紅細(xì)胞形態(tài)的是環(huán)形紅細(xì)胞
57.試帶法檢測尿液 PH 所用的指示劑是甲基紅和溴麝香草酚
58.本周蛋白尿?qū)儆谝绯鲂缘鞍啄?/p>
59.蛋白尿是指尿液中蛋白質(zhì)超過0.10g/ L
60.導(dǎo)致腎前性蛋白尿的疾病是擠壓綜合征
61.腎小管性蛋白尿見于器官移植
62.尿糖定性為陽性,血糖濃度超過8.88mmol/ L
63.酮體主要是機(jī)體內(nèi)脂肪的中間代謝產(chǎn)物
64.關(guān)于尿2-M的敘述錯誤的是2-M為腎小球性蛋白尿
65.反映腎小管功能損害最敏感的酶是尿 N ﹣乙酰﹣ B - D ﹣氨基葡萄糖苷酶
66.非孕婦尿中 HCG 的濃度<2.0ng/ L
67.尿液分析儀的組成包括機(jī)械、光學(xué)、電路系統(tǒng)
68.普通膳食情況下,脂肪約占糞便干重的10%~20%
69.脂肪瀉是指正常成人24h糞便中的脂肪總量超過 g
70.細(xì)菌約占糞便干重的1/3
71.成人糞便中的主要菌群是大腸埃希菌、腸球菌、厭氧菌,約占80%
72.糞便中球菌和桿菌的比例約為1:10
73.霍亂、副霍亂時糞便性狀是米泔樣便
74.會造成大便隱血試驗假陰性的是服用大量維生素 C
75.阿米巴痢疾及過敏性腸炎的糞便中可見夏科﹣雷登結(jié)晶
76.膽道梗阻時,糞便呈現(xiàn)白陶土色是由于沒有糞膽素
77.前列腺液約占精液的30%
78.角化前細(xì)胞屬于表層細(xì)胞
79.癌細(xì)胞多形性和癌珠是高分化鱗癌的標(biāo)志
80.腺癌是由柱狀上皮細(xì)胞惡變而來的癌
81.惡性腫瘤脫落細(xì)胞分化程度越高細(xì)胞形態(tài)畸形越明顯
82.惡性腫瘤脫落細(xì)胞分化程度越低胞質(zhì)量越少
83.屬于嗜酸性物質(zhì)的是嗜酸性顆粒
84.屬于嗜堿性物質(zhì)的是細(xì)胞核蛋白
85.既含酸性物質(zhì),又含堿性物質(zhì)的是中幼紅細(xì)胞
86.成年人外周血淋巴細(xì)胞絕對值是(0.8~4)X109/L
87.新生兒外周血白細(xì)胞總數(shù)的參考值范圍是(15~20) X 109/L
88.體外保存制品一般條件下,半衰期最短的是純化因子 VIII
89.白細(xì)胞制品輸注后易產(chǎn)生免疫反應(yīng)
90.燒傷患者需大量輸注的制品是白蛋白制品
91.表層移行上皮細(xì)胞又稱為尾形上皮細(xì)胞
92.來自腎小管的上皮細(xì)胞是復(fù)粒細(xì)胞
93.尿液中主要以清蛋白為主見于腎小球性蛋白尿
94.尿液中主要以本周蛋白為主見于溢出性蛋白尿
95.尿液中主要以α1-M和β2-M蛋白為主見于腎小管性蛋白尿
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