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檢驗技師/士考點:細菌遺傳物質(zhì)的檢測
大部分細菌是分解者,處在生物鏈的最底層。還有一部分細菌是消費者和生產(chǎn)者。比如硫細菌,鐵細菌等,他們是化能合成異養(yǎng)型,屬于生產(chǎn)者,可以利用無機物硫鐵等制造自身需要的有機物。而根瘤菌則是消費者,它們與豆科植物互利共生,消耗豆科植物光合作用所生產(chǎn)的有機物,因此為消費者。當然,細菌最主要的作用還是分解者,如果沒有細菌真菌等微生物,世界將是尸體的海洋。
(一)基因探針技術(shù)
用標記物標記細菌染色體或質(zhì)粒DNA上的特異性片段制備成細菌探針,待檢標本經(jīng)過短時間培養(yǎng)后,經(jīng)過點膜、裂解變性、預雜交和雜交后,利用探針上標記物發(fā)出的信號可以知道雜交結(jié)果并判斷病原體的性質(zhì);蛱结樇夹g(shù)操作比較復雜,加之同位素污染等問題,目前尚不能普及應用。近年來發(fā)展起來的地高辛標記的非同位素探針,從探針標記到雜交都很方便,只是價格昂貴,仍限于科研應用,尚不能普及。
(二)PCR技術(shù)
這是八十年代末發(fā)展起來的一項極有應用價值的技術(shù),設計病原體基因的特異引物,細菌標本(不經(jīng)培養(yǎng))經(jīng)過簡單裂解、變性后,就可在PCR儀上進行擴增反應,經(jīng)過25~30個循環(huán),通過瓊脂糖電泳即可觀察擴增結(jié)果,檢出病原體。這種技術(shù)的特點是簡便、快速。它尤其適于那些培養(yǎng)時間較長的病原菌的檢查,如結(jié)核桿菌、支原體等。PCR高度的敏感性使該技術(shù)在病原體診斷過程中極易出現(xiàn)假陽性,避免污染是提高PCR診斷準確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
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