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土壤微生物的知識
在我們的學(xué)習(xí)時代,大家最不陌生的就是知識點吧!知識點是知識中的最小單位,最具體的內(nèi)容,有時候也叫“考點”。你知道哪些知識點是真正對我們有幫助的嗎?下面是小編精心整理的土壤微生物的知識,歡迎大家借鑒與參考,希望對大家有所幫助。
土壤微生物的知識 篇1
土壤微生物的采集一般有土樣采集、增殖培養(yǎng)、培養(yǎng)分離、篩選最后進行純種分離、毒性試驗等。
1、采樣:
一般在有機質(zhì)較多的肥沃土壤中,微生物的數(shù)量最多,中性偏堿的土壤以細菌和放線菌為主,酸性紅土壤及森林土壤中霉菌較多,果園、菜園和野果生長區(qū)等富含碳水化合物的土壤和沼澤地中,酵母和霉菌較多。選擇一定的土壤環(huán)境采集土樣,將采集到的土樣盛入清潔的聚乙烯袋、牛皮袋或玻璃瓶中。
2、增殖培養(yǎng):
為了容易分離到所需的菌種,讓無關(guān)的微生物至少是在數(shù)量上不要增加,可以通過配制選擇性培養(yǎng)基,選擇一定的培養(yǎng)條件來控制。例如碳源利用的控制,可選定糖,淀粉,纖維素,或者石油等,以其中的一種為唯一碳源,那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長,而其它微生物就可能死亡或淘汰。這樣對下階段的純種分離就會順利得多。
3、培養(yǎng)分離:
盡管通過增殖培養(yǎng)效果顯著,但還是處于微生物的混雜生長狀態(tài)。因此還必須分離,純化。在這—步,增殖培養(yǎng)的選擇性控制條件還應(yīng)進一步應(yīng)用,而且控制得細一點,好一點。純種分離的方法有劃線分離法,稀釋分離法。
4、篩選:
這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,通過三角瓶的容量進行小型發(fā)酵試驗,以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。
關(guān)于菌種的識別,細菌、放線菌、酵母菌和霉菌,每一類微生物在一定培養(yǎng)條件下形成的菌落各具有某些相對的特征,利用觀察這些特征,來區(qū)分各大類微生物及初步識別、鑒定微生物。
土壤
一般取土壤表層5—10cm處土壤,如果土壤有翻動,應(yīng)更深一點,避免空氣中微生物污染。
1、我們一般都用那種封口袋(塑料的),紙袋不容易保持水分。
2、當(dāng)天采當(dāng)天快遞回來,不用加冰袋。
3、快遞一般三天就到,對微生物菌群影響不大。
4、在冰柜中4度保存,時間不要超過一個月,盡量隨采隨做。菌株分離(seperation)就是將一個混雜著各種微生物的樣品通過分離技術(shù)區(qū)分開,并按照實際要求和菌株的特性采取迅速、準(zhǔn)確、有效的方法對它們進行分離、篩選,進而得到所需的微生物的過程。
工業(yè)微生物產(chǎn)生菌的篩選一般包括兩大部分:一是從自然界分離所需要的菌株,二是把分離到的野生型菌株進一步純化并迸行代謝產(chǎn)物鑒別。
菌種可從以下幾個途徑進行收集和篩選:
(1)向菌種保藏機構(gòu)和個人索取有關(guān)的菌株,從中篩選所需菌株。國內(nèi)外著名的菌種保藏機構(gòu)有:微生物菌種保藏管理委員會(CCCCM),美國典型菌種保藏中心(ATTC),英國國家典型菌種保藏所(NCTC),日本的大阪發(fā)酵研究所(IFO)等。
。2)由自然界采集樣品,如土壤、水、動植物體等,從中進行分離篩選。
。3)從一些發(fā)酵制品中分離回的菌株,如從醬油中分離蛋白酶產(chǎn)生菌,從酒糟中分離淀粉酶或糖化酶的'產(chǎn)生曲等。該類發(fā)酵制品經(jīng)過長期的自然選樣,具有悠久的歷史,從這些傳統(tǒng)產(chǎn)品中容易篩選到理想的菌株。
菌株的分離和篩選一般可分為:采樣、富集、分離、產(chǎn)物鑒別、生化鑒定幾個步驟。
一、從土壤中采樣
1克土壤的含菌量大體有如下的遞減規(guī)律:細菌(108)>放線菌(107)>霉菌(106)>酵母菌(105)>藻類(104)>原生動物(103)
。ㄒ唬└鶕(jù)土壤特點
1.土壤有機質(zhì)含量和通氣狀況
采土樣最好的上層是5—25cm、一般每克上中含菌數(shù)約幾十萬到幾十億個,并且各種類型的細菌和放線菌幾乎都能分離到?偟膩碚f酵母菌分布土層最淺,約5—10cm;霉菌和好氧芽孢桿菌也分布在淺土層。
2.土壤的酸堿度和植被狀況
3.地理條件:南方、北方
4.季節(jié)條件:7—10月
。ǘ┎蓸臃椒
用取樣鏟,將表層5cm左右的浮土除去,取5—25cm處的土樣10—25g,裝入事先準(zhǔn)準(zhǔn)備好的塑料袋內(nèi)扎好、北方土壤干燥.在10—30cm處取樣。給塑料袋編號并記錄地點、土壤土質(zhì)、植被名稱、時間及其他環(huán)境條件。一般樣品取回后應(yīng)馬上分離。以免微生物死亡。但有時樣品較多,或到外地取樣,路途遙遠,難以做到及時分離,則可采先用選擇性培養(yǎng)基做好試管斜面,隨身帶走。到一處將取好的土樣混勻,取3—4g撒到試管斜面上.這樣可避免菌株因不能及時分離而死亡。
二、根據(jù)微生物生理特點取樣
1.根據(jù)微生物的營養(yǎng)類型
每種微生物對碳、氮源的需求不一樣,分布也有差異。若需要篩選代謝合成某種化合物的微生物,從大量使用、生產(chǎn)或處理這種化合物的工廠附近采集樣品,容易得到滿意的效果。不少微生物對碳源的利用是不完全專一的,如以油脂為碳源的某些脂肪酶產(chǎn)生菌同樣也可以分解淀粉獲得能源而生長。
2.跟據(jù)微生物的生理特性
三、特殊環(huán)境下采樣
1.局部環(huán)境條件的影響
2.極端環(huán)境條件的影響
土壤微生物的知識 篇2
土壤微生物的分離和純化
一、實驗?zāi)康?/strong>
1、掌握從土壤中分離、純化微生物的原理與方法。
2、學(xué)會根據(jù)微生物培養(yǎng)特征初步判斷未知菌的類別。
3、練習(xí)微生物接種、移植和培養(yǎng)的基本技術(shù),掌握無菌操作技術(shù)。
二、實驗原理
土壤是微生物生長和棲息的良好基地。土壤具有絕大多數(shù)微生物生活所需的各種條件,是自然界微生物生長繁殖的良好基地。因此,土壤是微生物資源的巨大寶庫。
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可用于培養(yǎng)細菌。鏈霉素可以抑制細菌和放線菌的'生長,對酵母菌和霉菌不起作用。
加入一定量鏈霉素的培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出酵母菌和霉菌。重鉻酸鉀或苯酚對土壤真菌、細菌有明顯的抑制作用,可用于選擇分離放線菌。
三、實驗器材
1、材料:10cm左右深層土壤。
2、培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基、高氏Ⅰ號培養(yǎng)基
3、其他物品:試管、三角瓶、燒杯、量筒、電子天平、精密pH試紙、培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌鍋、移液槍、槍頭、接種環(huán)、酒精燈、鏈霉素(1萬單位/ml)、10%苯酚、無菌水。
四、實驗步驟
1、土樣采集:取10cm左右深層土壤10g備用。
2、制備土壤稀釋液:稱取土壤1g,放入有99mL無菌水的三角瓶中,振蕩均勻,即為稀釋10-2的土壤懸液。然后進行十倍梯度稀釋,依次制備10-3、10-4、10-5、10-6、10-7稀釋度的土壤稀釋液。
3、培養(yǎng)基平板制備:按培養(yǎng)基配方各配置牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基、高氏Ⅰ號培養(yǎng)基各100ml。滅菌后分別倒3個平板。(高氏Ⅰ號培養(yǎng)基滅菌前加入10滴10%苯酚;馬丁氏培養(yǎng)基倒平板前加入2ml去氧膽酸鈉(2%)和0。4ml1萬單位/ml鏈霉素)
4、接種:用無菌吸管吸取0。1ml相應(yīng)濃度土壤稀釋液,以無菌操作技術(shù)接種在平板上,涂布均勻。細菌選用10-4、10-5、10-6三個稀釋度接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基,放線菌與霉菌選用10-2、10-3、10-4三個稀釋度,分別接種于高氏Ⅰ號培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基。(一個稀釋度一個平板)
5、培養(yǎng):細菌平板于37℃恒溫培養(yǎng)1~2d,放線菌于30℃培養(yǎng)2~3d,霉菌于30℃培養(yǎng)3~5d,觀察。
6、計數(shù):用稀釋水樣檢測平板的菌落計數(shù)方法進行計數(shù),報告細菌總數(shù)/(CFU·ml—1)
7、純化:挑取典型菌落接種于相應(yīng)平板,培養(yǎng)條件同上,培養(yǎng)純化。
五、思考題
1、分離放線菌和真菌為什么需要分別加重鉻酸鉀和鏈霉素?
2、怎么檢驗培養(yǎng)皿上的某個單菌落是不是純培養(yǎng)?
土壤微生物的知識 篇3
1.土壤微生物的類群
土壤中的微生物種類繁多,數(shù)量極大,一克肥沃土壤中通常含有幾億到幾十億個微生物,貧瘠土壤每克也含有幾百萬至幾千萬個微生物,一般說來,土壤越肥沃,微生物種類和數(shù)量越多。另外,土壤表層或耕作層中及植物根附近微生物數(shù)量也較多。土壤中的漸生物主要有細菌、真菌、放線菌、藻類和原生動物。土壤中的微生物以細菌數(shù)量最多,細菌占土壤微生物總量的70%~90%,而且種類多,它們多數(shù)是異養(yǎng)菌,少數(shù)是自養(yǎng)菌。放線菌的數(shù)量僅次于細菌,多存在于偏堿性的土壤中,主要是鏈霉菌屬、諾卡菌屬和小單孢菌屬等。放線菌雖然數(shù)量比細菌少,但由于其菌絲體的體積比單個細菌大幾十倍甚至幾百倍,所以在土壤中的生物量也相近于細菌。土壤中的真菌各種類型都有,但以半知菌類為最多,主要分布于土壤表層中。土壤中的藻類數(shù)量遠遠少于上述各類,主要有綠藻、硅藻等。土壤中的原生動物都是單細胞異養(yǎng)型的,主要是纖毛蟲、鞭毛蟲、根足蟲等。上要是纖毛蟲、鞭毛蟲、根足蟲等。
2.土壤微生物的作用
土壤中的微生物有些對農(nóng)業(yè)有害。如反硝化細菌,能把硝酸鹽還原成氨散失到大氣中,降低土壤肥力。但多數(shù)是對農(nóng)業(yè)有益的。
2.1合成土壤腐殖質(zhì)
腐殖質(zhì)是一種黑色的膠狀物質(zhì),它常與礦物質(zhì)顆粒緊密結(jié)合在一起,成為土壤有機質(zhì)的主要類型,對土壤肥力有重要的'影響。腐殖質(zhì)的形成,是由一些異養(yǎng)的微生物,如某些腐生細菌,把土壤中的動、植物殘體和有機肥料分解,然后再重新合成的。當(dāng)土壤溫度較低,通氣差時,嫌氣性微生物活動旺盛,腐殖質(zhì)合成速度加快,并得到積累。
2.2增加土壤有機物質(zhì)
每當(dāng)溫暖多雨季節(jié),在潮濕的土壤表層藻類大量繁殖。藻類具有光合色素,通過光合作用制造有機物,增加土壤中的有機物質(zhì)。固氮菌能固定空氣中的氮,成為自身的蛋白質(zhì),當(dāng)這些細菌死亡和分解后,其氮素即可被植物吸收利用,并使土壤中積累很多氮素。
2.3促進營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化
在土壤溫度高、水分適當(dāng)、通氣良好的條件下,土壤中的好氣性微生物活動旺盛,腐殖質(zhì)分解,釋放出其中的養(yǎng)分供植物吸收利用。硝化細菌能把有機肥料分解產(chǎn)生的氨轉(zhuǎn)變?yōu)閷χ参镉行У南跛猁}類。磷細菌分解磷礦石和骨粉,鉀細菌分解鉀礦石,把植物不能直接利用的磷和鉀轉(zhuǎn)化為能被植物利用的形式。土壤中的原生動物吞食土壤中的細菌、單細胞藻類、真菌孢子和有機物殘片等,對土壤中有機物的分解起著明顯的作用,并促進了物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。
2.4其他作用
土壤中的微生物除了上述的幾個作用外,還有一些其他的有益之處。如土壤中的真菌有許多能分解纖維素、木質(zhì)素和果膠等,對自然界物質(zhì)循環(huán)起重要作用。真菌菌絲的積累,能使土壤的物理結(jié)構(gòu)得到改善。放線菌能產(chǎn)生抗生素。如我國使用的“5406”是由涇陽鏈霉菌制成的?傊寥乐械奈⑸飳υ黾油寥婪柿Α⒏纳仆寥澜Y(jié)構(gòu)、促進自然界的物質(zhì)循環(huán)具有重要作用。
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