自然殺傷細(xì)胞活性臨床意義
K細(xì)胞主要分布在腹腔滲出液,外周血、脾臟中;NK細(xì)胞主要分布在骨髓、外周血和脾臟中。臨床主要用于腫瘤、病毒感染、寄生蟲感染、自身免疫和移植免疫等病人,檢測其K、NK細(xì)胞殺傷功能,在維持和調(diào)節(jié)特異性免疫中起重要作用。
自然殺傷細(xì)胞活性注意事項:
(1)要求效/靶細(xì)胞比為100∶1,若比>100∶1,自然殺傷率不呈對數(shù)增加。且標(biāo)本用量亦大。
(2)標(biāo)記靶細(xì)胞放置時間不宜過久。因隨時間延長死細(xì)胞增加,自然釋放率欠準(zhǔn)確。
(3)標(biāo)記的125IUdR濃度要合適,要求125IUdR的放射性濃度為1.11×107Bq/ml,如濃度過低,標(biāo)記率自然殺傷細(xì)胞活性檢查過程:
。1)效靶細(xì)胞作用:將分離好的淋巴細(xì)胞懸液(效應(yīng)細(xì)胞)和標(biāo)記的K562細(xì)胞(靶細(xì)胞)按100∶1的比例加入平底塑料試管中,按表1操作,同時設(shè)自然釋放管(作為對照管),每個標(biāo)本作了3個復(fù)管,最后用培養(yǎng)液使每管增至1ml,1500r/min離心,促進效靶細(xì)胞結(jié)合,置37℃、5%CO2孵箱內(nèi)孵育18h。
。2)酶促反應(yīng):取出孵育試管,棄去各管上清液,剩下的`細(xì)胞加一定濃度(2.2g/L)胰蛋白酶和DNA酶各0.1m1,混勻后37℃水浴30min,促使被攻擊的靶細(xì)胞釋放125IUdR,隨后各管立即加入0.8mlHank液終止酶促反應(yīng)。混勻后1500r/min離心2min。
(3)測放射強度和計算:用γ型計數(shù)器分別測各管(上清和細(xì)胞管)cpm值,按下式計算;
自然殺傷細(xì)胞活性不適宜人群:
造血功能減低的人如白血病、各種貧血、骨髓增生異常綜合癥等患者或血小板減少的人抽血時應(yīng)注意,不宜多抽或頻繁抽血。
自然殺傷細(xì)胞活性不良反應(yīng)與風(fēng)險:
1.抽血結(jié)束后,不要按揉針孔部位,以免造成皮下血腫。如果抽血處有小片青淤,輕微觸痛,請不要慌張,可過24小時后再做熱敷,以促進淤血吸收。一般的小量淤血會在3到5天的時候內(nèi)逐漸吸收而顏色變淺,恢復(fù)正常。
2.抽血后出現(xiàn)暈血癥狀如:頭暈、眼花、乏力等應(yīng)立即平臥、飲少量糖水,待癥狀緩解后再進行體檢。
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