2018臨床檢驗技師練習(xí)題：酶免疫技術(shù)
導(dǎo)讀:酶免疫技術(shù)是屬于臨床檢驗師要學(xué)習(xí)的一項內(nèi)容，大家在掌握時，可以依靠做練習(xí)的形式去鞏固知識點。下面是應(yīng)屆畢業(yè)生小編為大家搜集整理出來的有關(guān)于2018臨床檢驗技師練習(xí)題：酶免疫技術(shù)，想了解更多相關(guān)資訊請繼續(xù)關(guān)注考試網(wǎng)!
一、A1
1、下圖所示的為哪一種ELISA技術(shù)的反應(yīng)原理示意圖()。
A、雙抗原夾心法
B、雙位點一步法
C、間接法測抗體
D、競爭法
E、捕獲法
2、鉤狀效應(yīng)是指用ELISA一步法測定標(biāo)本中待測抗原時，抗原濃度過()，實測值偏()的現(xiàn)象，極易造成假陰性
A、低，高
B、高，高
C、高，低
D、低，低
E、高，不變
3、ELISA試驗中最常用的標(biāo)記酶是()。
A、AST
B、HRP
C、ACP
D、LDH
E、ALT
4、酶增強免疫測定技術(shù)是最早取得實際應(yīng)用的()。
A、均相酶免疫測定
B、異相酶免疫測定
C、固相酶免疫測定
D、液相酶免疫測定
E、固相-液相酶免疫測定
5、利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體的方法，通常稱為()。
A、雙抗體夾心法
B、雙位點一步法
C、間接法
D、競爭法
E、捕獲法
6、ELISA中最常用的固相載體是()。
A、聚氯乙烯
B、聚苯乙烯
C、三聚氧胺
D、瓊脂糖
E、尼龍膜
7、均相酶免疫測定不具有的特點是()。
A、常用于半抗原和小分子的檢測
B、操作簡便，易于自動化
C、不易受樣品中的內(nèi)源性酶的干擾
D、酶與抗原結(jié)合后仍保留酶和抗原的活性
E、靈敏度不及異相酶免測定
8、酶增強免疫測定技術(shù)(EMIT)是一種()。
A、非均相酶免疫測定技術(shù)
B、均相酶免疫測定技術(shù)
C、酶免疫組織化學(xué)技術(shù)
D、酶免疫測定與電泳相結(jié)合的技術(shù)
E、電泳技術(shù)
9、ELISA板包被后，最常用的封閉物質(zhì)是()。
A、人白蛋白
B、人球蛋白
C、牛血清白蛋白
D、牛血清球蛋白
E、鼠白蛋白
10、可用免疫滲濾試驗和免疫層析試驗檢測的項目沒有()。
A、抗HCV
B、HIV
C、HCG
D、HBsAg
E、HAV
11、制備抗體酶結(jié)合物的方法通常采用()。
A、戊二醛交聯(lián)法
B、糖原染色法
C、免疫印跡法
D、酶耦聯(lián)測定法
E、捕獲競爭法
12、下列不屬于ELISA測定方法中所必需的試劑()。
A、固相的抗原或抗體
B、酶標(biāo)記的抗原或抗體
C、酶作用的底物
D、戊二醛交聯(lián)劑
E、稀釋的血清
13、斑點免疫層析試驗最常用的載體材料是()。
A、乙酸纖維素膜
B、尼龍膜
C、濾紙
D、硝酸纖維素膜
E、玻璃纖維膜
14、用ELISA抗體夾心法檢測抗原A時，固相載體的包被物是()。
A、酶標(biāo)記A抗體
B、未標(biāo)記的抗A抗體
C、未標(biāo)記抗原A
D、酶標(biāo)抗球蛋白抗體
E、酶標(biāo)記的A抗原
15、ELISA檢測中“鉤狀效應(yīng)”(hookeffect)是指()。
A、間接法檢測抗體時抗體過量
B、雙抗體夾心一步法檢測抗原時抗原過量
C、雙抗體夾心法檢測抗原時RF的干擾
D、檢測的假陽性反應(yīng)
E、競爭法檢測抗體時特異性問題
16、ELISA試驗以HRP為標(biāo)記酶時，常用的供氧底物為()。
A、OPD
B、OT
C、YMB
D、ABTS
E、PNP
17、艾滋病病毒檢測的確診試驗通常采用的檢測方法是()。
A、競爭法
B、免疫印跡法
C、化學(xué)發(fā)光法
D、斑點-ELISA法
E、斑點免疫滲濾試驗
二、B
1、A.免疫印跡法
B.ELISA(雙抗體夾心法)
C.自身紅細(xì)胞凝集試驗
D.ELISA(間接法)
E.免疫組織化學(xué)技術(shù)
<1> 、測定HIV抗體確診HIV感染常用的方法是()。
<2> 、對相應(yīng)的抗原進(jìn)行定性、定位和定量測定常用的方法是()。
<3> 、檢測抗原最常用的方法是()。
<4> 、可用于HIV抗體、HBsAg的檢測的方法是()。答案部分
一、A1
1、【正確答案】 B
【答案解析】酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)的位點一步法是在雙抗體夾心法測定抗原時，如應(yīng)用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，則可如圖中所示，在測定時可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。此法不但簡化了操作，縮短了反應(yīng)時間，如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測定抗原的ELISA提高到新水平。
2、【正確答案】 C
【答案解析】
3、【正確答案】 B
【答案解析】在ELISA中，常用的酶為辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AP)。應(yīng)用AP系統(tǒng)，其敏感性一般高于應(yīng)用HRP系統(tǒng)，空白值也較低。但由于AP較難得到高純度制劑，穩(wěn)定性較HRP低，價格較HRP高，制備酶結(jié)合物時得率較HRP低等原因，國內(nèi)在ELISA中一般均采用HRP。
4、【正確答案】 A
【答案解析】均相酶免疫測定方法有酶增強免疫測定技術(shù)(EMIT)和克隆酶供體免疫分析方法。其中，酶增強免疫測定技術(shù)是最早取得實際應(yīng)用的酶免疫測定方法。
5、【正確答案】 C
【答案解析】間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理是利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，只要更換不同的固相抗原，就可以用一種酶標(biāo)抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體。
6、【正確答案】 B
【答案解析】酶免疫技術(shù)的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。最常用的固相載體物質(zhì)是聚苯乙烯。
7、【正確答案】 C
【答案解析】均相酶免疫測定是將半抗原或小分子抗原如藥物、激素、毒、興奮劑等與酶結(jié)合制成酶標(biāo)記物，酶與抗原(半抗原)結(jié)合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。均相酶免疫測定操作簡便、快速、適合于自動化，應(yīng)用廣泛，不僅可檢測藥物、激素、毒、興奮劑等半抗原或小分子抗原，也可測定大分子蛋白質(zhì)、病毒及細(xì)胞性抗原成分。
最大缺點是易受樣品中非特異的內(nèi)源性酶、酶抑制藥及交叉反應(yīng)物的干擾，而且由于采用競爭性結(jié)合分析原理，靈敏度不及異相酶免測定。
8、【正確答案】 B
【答案解析】酶增強免疫測定技術(shù)(EMIT)是均相酶免疫測定技術(shù)。EMIT的基本原理：半抗原與酶結(jié)合成酶標(biāo)半抗原，保留半抗原和酶的活性，當(dāng)酶標(biāo)半抗原與抗體結(jié)合后，所標(biāo)的酶與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響而活性被抑制，反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結(jié)果可推算出標(biāo)本中半抗原的量。
9、【正確答案】 C
【答案解析】將抗原或抗體固相化的過程稱為包被。由于載體的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體，通常將抗原或抗體溶于緩沖液(最常用的為pH9.6的'碳酸緩沖液)中，加于ELISA板孔中在4℃過夜，經(jīng)清洗后即可應(yīng)用。如果包被液中的蛋白質(zhì)濃度過低，固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)完全覆蓋，其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面，最后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。在這種情況下，如在包被后再用1%～5%牛血清白蛋白包被一次，可以消除這種干擾。這一過程稱為封閉。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性。
10、【正確答案】 E
【答案解析】免疫滲濾試驗和免疫層析試驗具有簡便、快速、單份測定、可立等結(jié)果等優(yōu)點，無需任何儀器設(shè)備，試劑穩(wěn)定，因此多用于急診檢驗。這類試驗不能準(zhǔn)確定量，所以主要限于檢測正常體液中不存在的物質(zhì)以及正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(zhì)。目前臨床檢驗中已開展的項目有HCG、抗HCV和抗HIV、HBsAg等，新項目正在不斷發(fā)展中。
11、【正確答案】 A
【答案解析】制備抗體酶結(jié)合物的方法通常有戊二醛交聯(lián)法、過碘酸鹽氧化法和標(biāo)記抗體鑒定法。
12、【正確答案】 D
【答案解析】 ELISA是在固相載體上包被抗原或抗體后，通過抗原抗體反應(yīng)使酶標(biāo)抗體(或酶標(biāo)抗原)結(jié)合到載體上，經(jīng)洗滌使結(jié)合的酶標(biāo)抗體和游離的酶標(biāo)抗體分離，洗去游離的酶標(biāo)抗體(或酶標(biāo)抗原)。在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體。②酶標(biāo)記的抗原或抗體。③酶作用的底物。間接法和捕獲法還使用稀釋的血清標(biāo)本做試劑。戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，可以使酶與蛋白質(zhì)或其他抗原的氨基通過它而耦聯(lián)。與ELISA的方法相反。
13、【正確答案】 D
【答案解析】斑點免疫層析試驗以硝酸纖維素為載體，利用微孔濾膜的毛細(xì)管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般。
14、【正確答案】 B
【答案解析】 ELISA抗體夾心法檢測抗原A時，固相載體的包被物是未標(biāo)記的抗A抗體。
15、【正確答案】 B
【答案解析】在雙位點一步法測定中，應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)，類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測抗原濃度相當(dāng)高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物，所得結(jié)果將低于實際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
16、【正確答案】 A
【答案解析】許多化合物可作為HRP的供氧體，在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺(OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(FMB)和ABTS。OPD為在ELISA中應(yīng)用最多的底物，靈敏度高，比色方便。
17、【正確答案】 B
【答案解析】在艾滋病病毒感染中免疫印跡法作為確診試驗。
二、B
<1>、【正確答案】 A
【答案解析】免疫印跡法在艾滋病病毒感染中作為確診試驗。
<2>、【正確答案】 E
【答案解析】免疫組織化學(xué)技術(shù)是指酶標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對相應(yīng)的抗原進(jìn)行定性、定位和定量測定的一項技術(shù)。
<3>、【正確答案】 B
【答案解析】
<4>、【正確答案】 C
【答案解析】自身紅細(xì)胞凝集試驗可用于HIV抗體、HBsAg的檢測，靈敏度與間接血凝試驗相仿。
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