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影響生化檢測的常見因素分析
除疾病之外,還有許多因素也可影響生化檢測的結(jié)果。這些因素可能在分析過程的前中后。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P(guān)于影響生化檢測的常見因素分析的知識,歡迎閱讀。
影響生化檢測的常見因素分析 篇1
分析前因素
分析前因素與病患本身,樣本收集,樣本處理等因素相關(guān),這些因素通常會影響到分析前體液樣本的組成。包括以下幾個方面:
生物因素:病患與生具來的且可被控制的因素。
非生物學(xué)因素:包括樣本收集,處理,儲存,抗凝劑的使用。
分析中因素
分析中因素是能夠影響分析程序的因素。
干擾因素:脂血癥,溶血,黃疸,高蛋白血癥,藥物。以及其他更多情況。
質(zhì)量控制:確保測試操作和結(jié)果的準(zhǔn)確性。
分析后因素涉及到實驗室數(shù)據(jù)呈現(xiàn)、存儲和傳遞給臨床醫(yī)生的不同方式。
只要有可能,盡量控制以上三類因素,減少對實驗結(jié)果的影響。
1、分析前因素
在實驗室分析樣品之前,分析前因素影響樣品的組成(因此也將影響樣品質(zhì)量)。
這些因素是實驗室分析中最重要和最常見的誤差來源,卻常在分析實驗數(shù)據(jù)時被忽略。
應(yīng)該盡量控制這些因素,減少對實驗結(jié)果的影響。控制分析前因素包括獸醫(yī)或技師進(jìn)行樣本的充分采集,準(zhǔn)備和處理。當(dāng)然也存在一些不能被控制的因素,例如評估疾病引起的結(jié)果時,必須考慮并識別物種的遺傳性生理差異。
分析前因素包括生物性和非生物性因素。
1.1 生物性因素
某些因素是動物固有的,例如品種,年齡,和性別。但在評估檢測結(jié)果時需考慮。記住,實驗室提供的絕大多數(shù)的參考值適用于健康的成年動物。獸醫(yī)可以控制其他生理性因素,例如當(dāng)準(zhǔn)備血液樣本時,確保動物已禁食12小時。
1.1.1 固有的生物性因素
物種:物種特異性導(dǎo)致分析來源和分析結(jié)果都存在顯著差異。例如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是小動物而不是大動物的肝特異性酶。因此,必須將動物的生化結(jié)果與相同物種的參考區(qū)間進(jìn)行比較,例如,不能使用馬的參考區(qū)間來分析驢的生化結(jié)果。
品種:生化分析中存在與品種相關(guān)的差異,但這些差異通常較小。健康馱馬比純種良馬通常肌酸激酶值更高。
年齡:許多生化分析成分隨年齡而變化,幼畜生化結(jié)果經(jīng)常有變化,但不是因為疾病,而是與年齡有關(guān),比如所有動物幼畜的堿性磷酸酶都偏高。一般來說,由臨床病理學(xué)實驗室提供的大多數(shù)參考范圍多通過成年動物確定,不太適用于幼齡動物。
性別:雌性動物懷孕或哺乳相關(guān)的生理狀態(tài),可在非疾病狀態(tài)下影響分析結(jié)果。在一些物種中,可能存在不同性別的單獨(dú)參考區(qū)間,例如,人體內(nèi)的血清鐵。一般來說,家畜幾乎沒有與性別相關(guān)的檢測偏差。
1.1.2 可控的生物性因素
樣本采集技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化可以使這些因素對生化檢測結(jié)果的影響最小化。如果這些因素是不可避免的或被需要的(例如,在運(yùn)動后采集樣品以檢測馬中的橫紋肌溶解癥),結(jié)果分析期間必須考慮這些因素。
近期食物攝入:這將導(dǎo)致餐后脂血。脂血可能影響某些血漿成分的測量分析方法,從而導(dǎo)致結(jié)果無效?梢酝ㄟ^禁食12小時收集適當(dāng)?shù)臉悠穪肀苊獠秃笾。事實上,禁食后脂血升高是繼發(fā)于疾病的脂質(zhì)異常代謝的有利證據(jù)。
最近的進(jìn)食可能影響與脂血癥無關(guān)的`某些血漿成分濃度,例如葡萄糖。這種效應(yīng)因為食物代謝的差異(例如非反芻與反芻動物相比)存在明顯的物種依賴性。
應(yīng)激:應(yīng)激(繼發(fā)于動物處理或潛在疾病)將對實驗室結(jié)果產(chǎn)生較大影響。應(yīng)對幼齡或未馴化動物的應(yīng)激尤為重要,在采集血液樣本時應(yīng)可能降低動物應(yīng)激。
運(yùn)動:運(yùn)動對于血漿成分的影響取決于運(yùn)動的類型和強(qiáng)度。一般而言,應(yīng)該在動物運(yùn)動之前進(jìn)行血液樣本的采集。
藥物:給藥方式,例如肌肉內(nèi)給藥將直接影響分析結(jié)果。藥物本身也可干擾被分析物的測量。
1.1.3 藥物干擾
可分成兩大類:藥物的生理作用(體內(nèi))或代謝物對被分析物的影響
在體外,藥物及其代謝物的某些物理或化學(xué)性質(zhì)也會干擾實際檢測過程。對檢測能產(chǎn)生顯著干擾的治療藥物是血紅蛋白類氧載體(HBOC),例如血液增強(qiáng)劑Oxyglobin。它是從牛血清中發(fā)現(xiàn)的一種呈黑紅色的聚合血紅蛋白。因為這種化合物的固有顏色,Oxyglobin在治療貧血動物可造成相同于血漿/血清溶血的情況。它在血液學(xué),生化和尿檢的結(jié)果中都產(chǎn)生了明顯的干擾,在生化檢測中的干擾取決于檢測方式和儀器的使用。制造商正在努力開發(fā)新的方法來補(bǔ)償或消除來自HBOCs的干擾,因此未來可能在給予HBOCs的動物中也能獲得精確的檢測結(jié)果。這提示我們血液樣品應(yīng)在給予貧血動物HBOC之前收集,以盡量減少對檢測結(jié)果的影響。
實驗室應(yīng)該被告知任何治療藥物的使用,以此可采取措施降低藥物造成的影響。然而,獸醫(yī)學(xué)中關(guān)于藥物對動物或分析技術(shù)有哪些影響還了解甚少,除了例如皮質(zhì)類固醇,溴化物的例子。所以,任何異常的生化檢測結(jié)果應(yīng)該結(jié)合動物完全的用藥史分析。
1.2 非生理性因素
非生理因素包括樣本采集,處理和運(yùn)輸。應(yīng)盡量控制這些因素以減少對實驗室結(jié)果的影響。
1.2.1 樣本采集
靜脈穿刺:清潔的靜脈穿刺是減少人為誤差的重要條件之一。錯誤的靜脈穿刺技術(shù)可能引起溶血,從而通過多種方式導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生誤差。例如高鉀紅細(xì)胞將導(dǎo)致鉀假性升高,紅細(xì)胞中AST導(dǎo)致AST假性升高(比如貓),檢測過程中化學(xué)反應(yīng)釋放相關(guān)成分導(dǎo)致CK假性增高。止血試驗中錯誤的靜脈穿刺產(chǎn)生的組織因子將污染樣品,導(dǎo)致樣品管中的沉淀凝血,以無法預(yù)知的方式延長或縮短凝血時間測定。可通過將血液直接收集到檸檬酸鹽抗凝血劑(預(yù)填充注射器或直接進(jìn)入真空采血管)中減少誤差影響。
抗凝劑:抗凝劑將影響檢測結(jié)果。
血液檢測:最好使用EDTA抗凝血劑,檸檬酸鹽將稀釋樣本,肝素將引起細(xì)胞凝集,兩者都將減少計數(shù)。
生化檢測:肝素化血漿或血清(無抗凝血劑)樣品適用于生化檢測。因為同一患者的血漿與血清的檢測結(jié)果不同。所以如果需要連續(xù)監(jiān)測同一患者,應(yīng)使用相同的樣品。血漿里含有纖維蛋白原,而血清中沒有(在凝血期間移除),因此檢測結(jié)果里血漿的總蛋白(和球蛋白,因為纖維蛋白原是β球蛋白)的結(jié)果比血清高。凝血期間鉀從血小板中釋放,因此血清鉀高于血漿鉀(后者結(jié)果更準(zhǔn)確)。氟化物-草酸鹽抗凝劑可用于葡萄糖的測量,它會抑制細(xì)胞代謝,應(yīng)馬上將血清/血漿從細(xì)胞分離,因為該抗凝血劑會誘發(fā)嚴(yán)重的溶血。檸檬酸鹽和EDTA抗凝劑不適用于生化檢測,因為它們會螯合二價陽離子(鈣,鎂)并含有高濃度的鈉(檸檬酸鹽)或鉀(EDTA)。即使是在輕度EDTA污染的血液樣品中進(jìn)行生化檢測都會出現(xiàn)超高鉀和超低鈣的結(jié)果。一些酶的活性也需要二價陽離子。因此,在含有EDTA或檸檬酸鹽做抗凝劑的血漿中,這些酶(例如堿性磷酸酶)的檢查結(jié)果會虛假偏低。
凝血測試:最好使用檸檬酸抗凝劑(對鈣有輕度螯合作用,因此鈣可以回到樣本中以進(jìn)行凝血篩選測定)。不能使用肝素(樣品不會凝結(jié)),EDTA可以使用(鈣可以回到樣本中),但不是很可靠所以不推薦使用。
1.2.2 樣本處理和儲存
樣品收集后,應(yīng)嚴(yán)格注意樣品處理,以盡量減少這些因素對結(jié)果的影響。
分離:只要有可能,尤其是當(dāng)樣品收集和實驗室送檢之間有延遲時,應(yīng)在樣品收集后盡快分離細(xì)胞中的血清或血漿。包括使樣品凝結(jié)(對于血清)和離心樣品以分離出血液組分。應(yīng)該將血清或血漿從細(xì)胞中分離并置于新的凝集(無抗凝血劑)管中。管應(yīng)標(biāo)記為“血漿”或“血清”。未與細(xì)胞分離的樣品具有較低的葡萄糖濃度(在儲存期間由細(xì)胞消耗),即使沒有明顯的溶血,濃度較高的一些成分,將從紅細(xì)胞中滲出,例如馬血液中的鉀。血清分離器(或Corvac)的專用管,材料含有硅膠,可以將血清和凝塊分離。即使使用這些管,仍應(yīng)該取出血清并放置到新的凝血管中,尤其當(dāng)專用管不是全新狀態(tài)(硅膠如果裂開也將影響樣本)。
標(biāo)記:患者的所有體液樣品應(yīng)正確標(biāo)記好患者姓名,標(biāo)識和樣品類型(例如血清,血漿,滑液,腹膜液)。實驗室不負(fù)責(zé)樣品的正確標(biāo)記,可以想象,一個不正確的標(biāo)簽標(biāo)本將對病人護(hù)理產(chǎn)生多么嚴(yán)重和有害的后果。
儲存:一般情況下,通常從樣品收集到實驗室送檢之間至少有24小時的延遲。因此,從細(xì)胞中快速分離血清/血漿和保持樣品冷卻(使用冰袋)對于保持酶活性最大化和防止結(jié)果出現(xiàn)誤差是非常有必要的。如果預(yù)計長時間(> 24小時),建議將樣品冷凍,并使用干冰將樣品運(yùn)輸至實驗室。樣本存儲的方法取決于樣本檢測類型,一些樣品凍結(jié)也不是很穩(wěn)定,所以應(yīng)該經(jīng)常向?qū)嶒炇易稍儾煌瑯颖镜膬Υ娣椒ā?/p>
2、分析中因素
分析中因素通過影響儀器測量分析物的過程。由于儀器類型的差異,不同實驗室會對檢測結(jié)果產(chǎn)生不同影響。分析因素由樣品固有屬性引起,例如血脂的干擾,或分析儀本身的固有特征。儀器本身的誤差可通過實驗室的質(zhì)量保證程序降至最小化。
干擾
脂血,游離血紅蛋白(溶血),黃疸(高膽紅素),高球蛋白和藥物,這些內(nèi)源性物質(zhì)對檢測結(jié)果的干擾程度取決于儀器類型、檢測方法以及樣品中的干擾物質(zhì)數(shù)量(即實驗室特異性)。在康奈爾大學(xué)臨床病理學(xué)實驗室中使用的化學(xué)分析儀將測量樣品中脂血,溶血和黃疸的含量,并將這些值作為指數(shù),用于評價這三種內(nèi)源性干擾物質(zhì)對化學(xué)結(jié)果的影響程度。
高蛋白血癥:單克隆免疫球蛋白(副蛋白),特別是當(dāng)以高濃度存在時,通過以下機(jī)制干擾生化分析:
高粘度:影響樣品體積,粘度取決于免疫球蛋白的類別(免疫球蛋白如何形成高粘度,為何形成?)
與被檢測物結(jié)合:與一些被檢測物結(jié)合的免疫球蛋白將增加或減少分析成分,例如已經(jīng)有一例犬慢性淋巴細(xì)胞白血病和犬IgM單克隆丙種球蛋白病病例中發(fā)現(xiàn)了高磷酸鹽血。
體積變化:這類似于脂血癥的影響。什么疾病導(dǎo)致單克隆丙種球蛋白病?
藥物:給藥方式不同的藥物干擾可能使結(jié)果產(chǎn)生偏差。在獸醫(yī)學(xué)中最常見的藥物干擾之一是犬溴化物(抗驚厥藥)療法,檢測樣品的氯化物值將人為升高。臨床獸醫(yī)應(yīng)該告知實驗室使用在待檢動物身上的的任何藥物,這有助于減少藥物對化學(xué)測試的影響(但通常不會消除)。
檢測程序
控制和最小化影響測定性能的因素包括質(zhì)量保障。
臨床病理實驗室的目標(biāo)是提供準(zhǔn)確和精確的結(jié)果。質(zhì)量保證是通過實施清楚明確的實驗室操作規(guī)程和質(zhì)量控制程序來實現(xiàn)。
質(zhì)量控制程序取決于測量對照血清中被分析物的濃度(同預(yù)定的分析物值對比)。通常落在預(yù)定(可接受)限度之外的控制值表示程序存在問題?的螤柎髮W(xué)的臨床病理學(xué)實驗室每天都會對分析儀器進(jìn)行對照檢測。除非對照值在可接受的范圍內(nèi),否則不對患者樣品進(jìn)行分析。此外,實驗室參與外部質(zhì)量控制計劃,分析未知樣品時候,會將結(jié)果與使用相同儀器的其他實驗室的結(jié)果進(jìn)行比較。如果本校實驗室的結(jié)果與平均值的偏差較大,表明存在程序性問題,應(yīng)即時糾正。
影響生化檢測的常見因素分析 篇2
一、標(biāo)本的因素
1.生理因素對生化檢驗結(jié)果的影響
影響檢驗結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型。主要有年齡、性別、運(yùn)動、情緒、體位改變、生活方式、妊娠、季節(jié)變化、海拔高度、生理性波動等。
2. 飲食對生化檢驗結(jié)果的影響
3. 藥物對生化檢驗結(jié)果的影響
藥物引起生化檢驗結(jié)果出現(xiàn)誤差的原因可分為物理干擾和化學(xué)干擾。
3.1物理干擾是由于藥物進(jìn)入體內(nèi)后使血清的物理性質(zhì)如顏色等發(fā)生變化進(jìn)而影響某些項目的檢測;
3.2化學(xué)干擾是由于藥物本身的化學(xué)性質(zhì)如藥物的強(qiáng)還原性等對體內(nèi)某些物質(zhì)測定的影響。許多藥物的副作用使肝腎功能發(fā)生改變而引起檢驗結(jié)果異常。值得注意的是長期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時可使標(biāo)本稀釋,造成某些項目結(jié)果偏低,又因靜脈點(diǎn)滴時高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中,使許多檢驗結(jié)果發(fā)生巨大變化。因此護(hù)理人員應(yīng)避免在靜點(diǎn)時和用藥4h以內(nèi)采取檢驗標(biāo)本,必要時停藥后再查,以防藥物的干擾作用。
4.標(biāo)本采集對生化檢驗結(jié)果的影響
5.標(biāo)本處理、儲存對生化檢驗結(jié)果的影響標(biāo)本的離心速度、時間,離心前放置的時間、以及標(biāo)本貯存的溫度、時間等都會對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。
6.標(biāo)本狀態(tài)對生化檢驗結(jié)果的影響
6.1溶血是臨床生化檢驗中最常見的一種影響因素,它能引起很多指標(biāo)明顯異常。溶血的干擾機(jī)理有以下三種:
(一)細(xì)胞中高濃度組分溢出,使測定結(jié)果增高,血細(xì)胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH、ACP、AST、K+,只要輕微溶血就可以對這些項目產(chǎn)生很大影響。另外若某些物質(zhì)的血細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度時,則溶血相當(dāng)于血清被稀釋,因而使這些血清成分特別是發(fā)生重度溶血時的檢測值降低,這類項目主要有Ca2+、Na+、CIF、UA等。
。ǘ┭(xì)胞成分進(jìn)入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其他物質(zhì)的濃度改變,如溶血后紅細(xì)胞的'磷脂進(jìn)入血清被血清中的磷酸酯酶水解,其結(jié)果造成血清無機(jī)磷濃度顯著增高。
。ㄈ┑鞍妆旧眍伾珜z測的光學(xué)干擾,血紅蛋白的顏色在431nm和555nm波長附近能使比色、比濁法的吸光度增高。
實際上,以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時存在并可相互作用,因而使受影響的檢項更為復(fù)雜,這在超微量、高精度和多指標(biāo)的檢測分析中顯然不可忽視,因此,嚴(yán)控標(biāo)本溶血是保證檢驗質(zhì)量的重要方面。
6.2脂血對生化檢測的干擾
血液脂濁可散射光線,所以對吸光度一般產(chǎn)生正向干擾,導(dǎo)致某些項目如ALB、UA、總蛋白等測定結(jié)果。
6.3黃疸膽紅素對反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大。一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法、連續(xù)監(jiān)測法來消除膽紅素對黃色結(jié)果的影響,但由于膽紅素不穩(wěn)定,隨著膽紅素被氧化為膽綠素、膽褐素而變色,此時如果使用兩點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測法同樣也不能排除膽紅素對結(jié)果的干擾。此外膽紅素作為一種還原劑對氧化反應(yīng)有干擾,如氧化酶法測定GLU、TG、UA、膽固等,因為膽紅素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng),從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少,導(dǎo)致結(jié)果偏低。此時也可用雙波長法或設(shè)計樣本空白消除干擾,亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時可先除蛋白,然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素,可大大減低甚至消除膽的干擾。
二、環(huán)境的因素包括生化分析儀的用水、電源以及環(huán)境的溫濕度等方面對生化檢測的結(jié)果都會產(chǎn)生影響。
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